观赏凤梨的组织培养快速繁殖技术研究 (2).docVIP

凤梨是凤梨科多年生单子叶常绿植物，品种繁多，株型独特，叶形优美，花形花色丰富漂亮，是一种既可观花又可观叶的盆栽花卉，具有很高的观赏价值，深受人们喜爱。从20世纪90年代开始，国外观赏凤梨新品种开始进入我国花卉市场，90年代中后期，我国开始从国外进口观赏凤梨种苗进行栽培技术与花期调节和繁殖技术的研究。近年来，我国规模化生产凤梨的种苗主要靠国外进口，价格昂贵。应用组培技术进行观赏植物繁殖，具有繁殖速度快、不受季节影响等特点，对于优良品种的引进和推广意义重大。本研究拟通过组织培养的方法来大量繁殖观赏凤梨种苗，以满足生产和市场的需要。　　1材料与方法　　1.1 外植体的选择与处理以观赏凤梨杂交品种empire”为母株，用流水洗净植株，剥净其叶片，选取3cm长的茎上段，在超净工作台上用70％酒精消毒15秒钟，倒尽酒精后，用0.1％升汞溶液消毒10分钟，倾出升汞液，用无菌水冲洗6--8次，将材料竖立浸泡在无菌水中待用。用解剖刀细心剥净残留下的一圈圈叶片基部组织，切下3mm的顶端或稍长的茎段接种于诱导培养基。　　1.2培养基与培养条件诱导培养基：ms十6一ba0.3～0.5mg/l+naa0.2～0.5mg／l+活性碳0.5g/l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l，ph为5.8。增殖培养基：ms+6一ba3mg/l+naa0.1mg／l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l，ph为5.8。生根培养基：ms+iba1mg／l+蔗糖30g/l+琼脂6g/l，ph为5.8。培养条件：温度25～28℃，每日光照12h，光照强度1500lx左右。　　2结果与分析　　2.1初始无菌芽的诱导外植体接种于诱导培养基3～5d后，即发生变褐现象，连培养基也会变褐，应及时将外植体转接于新鲜培养基。如此3～4次后褐化现象缓解，此时可每10-15d转接一次。40d后发现顶芽伸长或有新的绿点冒出，有的侧芽也萌动生长，继续于诱导培养基培养，待芽长到1cm时，即可将其切下接种于增殖培养基。　　2.2丛生芽的获得与增殖将诱导培养基上获得的无菌芽培养于芽增殖培养基，2个月后即可获得丛生芽。以后每30～40d，将丛生芽进行分块切割，接种于新鲜的芽增殖培养基进行增殖培养，丛生芽不断切分继代，即可使芽大量增殖。　　2.3生根培养与移栽将长到2cm左右的丛生芽单个切下，转入生根培养基培养，30d左右生根，培养约50d，小苗高3--4cm.并长有3--4条根时即可移栽。移栽前将长好根的瓶苗打开瓶盖，室内炼苗3～4d，取出小苗，洗净培养基后移栽到育苗盘中，育苗盘中的基质为80％草炭加20％珍珠岩。栽植前浇透水，栽植后遮荫保湿，环境温度保持在25℃左右。如此移栽的观赏凤梨小苗存活率为95％左右。　　3.1外植体消毒是组培成功与否的第一关键步骤。由于凤梨叶片呈莲花状紧密排列，消毒困难。为提高消毒效果，在处理外植体过程中要尽可能剥尽其基部叶片，但又不能伤及嫩茎组织，以免影响培养效果。　　3.2在观赏凤梨组织培养过程中，外植体培养3～5d就会发生褐变，严重时培养基也会变红，此时应及时将外植体转接于新鲜培养基，如此重复3--4次后可缓解褐化现象，否则培养材料会因褐化死亡而无法获得无菌芽。研究发现，当外植体被接种于培养基后，先暗培养一段时间或在培养基中附加0.5％活性碳可在一定程度上减轻褐变程度。　　3.3组培技术应用成败很大程度上取决于试管苗移栽的成活率。移栽前将长好根的瓶苗打开瓶盖，室内炼苗3-4d后再移栽，有利于试管苗逐渐适应外界环境，对提高试管苗移栽的成活率具有一定的促进作用。在移栽前，一定要洗净试管苗根部的培养基，否则试管苗会发霉、烂根而影响其成活率。我们通过研究建立了观赏凤梨快速繁殖的技术体系，并进行规模化生产，以满足市场需求。（来源：上海农业网）