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乙肝病毒检测方法学评价
乙肝病毒检测
——方法学评价
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乙肝病毒结构
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(一) 乙型肝炎病毒结构特点
HBsAg:是HBV感染的主要标志
HBsAb:保护性抗体
HBcAg:仅存于感染的肝细胞核内,
一般不存在于血循环中
HBcAb: 非保护性抗体,HBcAb-IgM
提示HBV处于复制状态
HBeAg:HBV复制及强感染性的指标
HBeAb:有一定的保护作用,预后良好
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患者血清中存在三种基本形态
大球型颗粒,又称Dane颗粒;小球型颗粒;管型颗粒
小球型颗粒;管型颗粒
管型颗粒
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乙型肝炎病毒的实验室诊断
(一)血清学检查
(二)生化学检查
(三)HBV DNA、基因型和变异检查
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血清学检查
项目:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM
方法
ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,最常用,定性)
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HBsAg – 感染的标志
Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗
Anti-HBc IgM – 急性感染标志
Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染
HBeAg – 急性病毒复制,有传染性
Anti-HBe –病毒不再复制
HBV-DNA – 急性病毒复制,比HBeAg更准确;主要用于监测治疗反应
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HBV血清学标志物的临床意义
感染模式
HBsAg
HBeAg
HBc(IgM)
抗HBc(IgG)
抗HBe
抗HBs
临床意义
1
+
-
-
-
-
-
急性乙肝潜伏期后期,携带者。
2
+
+
-
-
-
-
急性乙肝早期或潜伏期
3
+
+
+
-
-
-
急性乙肝早期
4
+
+-
+
+
-
-
急性乙肝后期
5
+
+-
+-
-
-
-
急性或慢性乙肝,有HBV复制
6
+
+
+-
+-
+
-
急性或慢性乙肝。急性期或无症状携带者
7
+
-
+-
+
+
-
阴性慢性乙肝
8
+
-
-
-
+
-
慢性乙肝,无或低度HBV复制,乙肝恢复期,既往感染,隐匿性
9
-
-
-
+
-
+
乙肝恢复期,既往感染,隐匿性
10
-
-
-
-
-
+
慢性乙肝,接种过乙肝疫苗。
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两对半的意义
— 乙型肝炎的诊断
— 判断传染性
— 判断预后
— 筛查献血员
— 流行病学调查
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乙肝三系定性检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查,对患者病情程度的评估参考性不大,所以乙肝患者在做乙肝三系定性检查的时候,应结合肝功能检查、乙肝病毒DNA检查、B超检查等来判定病情的轻重,
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ELISA检测灵敏低的原因及局限
ELISA法受其自身敏感性和特异性的限制;
HBV S和前C基因区出现位点突变导致HBsAg和HBeAg表达缺陷。
影响因素多,如加样时间,试剂平衡时间,样本溶血程度等等。特别是低浓度样本易导致假阴性结果,使弱阳性样本漏检。
急性感染的窗口期; HBsAg检测方法灵敏度不足;血清亚型的漏检等。
标本中病毒颗粒少;
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血清学检测的局限性
HBV具有“检测窗口期
假阴性结果
无法检测突变株及抗体
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