还原型谷胱甘肽抗白血病免疫佐剂作用实验研究论文.docVIP

　　还原型谷胱甘肽抗白血病免疫佐剂作用实验研究论文 .freelic Immune Adjuvant Abstract To investigate the reversal effect of reduced glutathione(GSH) on suppression of NK cells by reactive oxygen metabolites (ROM) in K562 cells，interleukin-2 (IL-2) or mononuclear cell (Mo) ine dihydrochloride (DHT) or GSH ixed cultured cell lines，the ROM production and K562 cell suppression rate 33.17±5.08 U/L to 223.59±9.41 U/L by IL-2，and K562 cell suppression rate increased from 65.56% to 85.89% by IL-2 (P 0.01).The ROM yields l， 456.74±42.77 U/ml and 601.42±21.92 U/ml respectively，and K562 cell suppression rates ixed cultured cell lines under ratios of E/Mo being 10/2，10/5 and 10/10.o ixed cultured cell line ROM yield decreased from 389.79±3.83 U/L to 50.21±2.4 U/L or-3.58±9.49 U/L (P 0.05) respectively. yield in the mixed cultured cell line decreased (P 0.05)，the K562 cell suppression rate increased from 82.53% to 94.64% or 96.39% (P 0.05)，the more ROM yield，the less K562 suppression rate (P 0.05).o is 10/5 or 10/10，the ROM yield decreased by the high concentration of DHT or GSH (P 0.05)，but the K562 cell suppression rate not increased by every concentration of DHT or GSH.GSH ay reverse ROM and increase K562 cell suppression rate，and GSH is as effective as DHT，but GSH has less side-effect than DHT.Therefore，GSH ia immune adjuvant. Key ia; immune adjuvant; reactive oxygen metabolite; NK cell 人们很早就发现，肿瘤组织内及其周围存在着大量T/NK细胞。与机体其他部位相比，肿瘤及其周围组织中的T/NK细胞功能显著降低［1］。当今，常以T/NK细胞为效应细胞，以IL-2为刺激剂作为肿瘤的过继性免疫治疗的手段，但对大部分病人疗效不佳，其原因是肿瘤及其周围组织内也存在大量富含单核/巨噬细胞的单个核细胞 (Mo)。 Mo 对荷瘤动物淋巴细胞抗肿瘤作用有抑制效应，这种抑制作用与Mo分泌反应性氧代谢物（reactive oxygen metabolites，ROM）密切相关［2］。二氢氯化物组胺（简称组胺）可以逆转ROM对T/NK抗肿瘤活性抑制作用，并且已做II期临床试验，效果明显［1］，但其毒副作用大，临床难于应用。为了寻求高效低毒、便于临床应用的ROM逆转剂，我们进行了还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）在体外白血病细胞株培养体系中逆转ROM、增强NK细胞杀伤K562细胞的实验研究，现将结果报道如下。 材料和方法 材料 K562细胞株由福建医科大学附属协和医院老年病研究所朱元贵博士惠赠，新鲜健康人单的采白细胞由泉州市中心血站提供，IL-2为北京双鹭药业公司产品，二氢氯化物组胺、GSH和MTT均为Sigma公司产品，CD3、CD56免疫组织化学试剂盒为北京中山公司产品，活性氧测试剂盒为南京建成公司产品。 方法 富含NK细胞的单个核细胞（E）的分离 采用Percoll不连续密度梯度分离法［2］分离，采用免