第五章反胶团萃取1教程.ppt

* 影响絮凝的因素 絮凝剂的加量 絮凝剂的分子量 溶液的pH 搅拌速度 搅拌时间 * 杂蛋白的其他去除方法 1）变性沉淀 热变性：适于热稳定物质 大幅度调整pH：根据产物特性反向调节， 加有机溶剂，等电点沉淀 * 2）化合法沉淀 在酸性溶液中，蛋白质与阴离子形成沉淀，如：三氯乙酸，水杨酸盐，钨酸盐，苦味酸盐，鞣酸盐，过氯酸盐等 在碱性溶液中，与阳离子形成沉淀，如：Ag+，Cu2+，Zn2+，Fe3+，Pb2+等 * 高价无机离子的去除 Ga2+：加入草酸和草酸盐，生成草酸钙；加入磷酸盐，生成磷酸钙 Mg2+：加入草酸；加入磷酸盐，生成磷酸镁；三聚磷酸钠（Na5P3O10），生成可溶性络合物 Fe3+：加入黄血盐，生成普鲁士兰沉淀 * 基本概念及分类 概念：萃取是利用溶质在互不混溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的技术。 分类： 液-固萃取 液-液萃取 化学萃取 物理萃取 双水相萃取 超临界萃取 萃取原理 参与溶质 分配的两 相不同 萃取小结 * 概念：用某种溶剂把有用物质从固体原料中提取到溶液中的过程称为固-液萃取，也称浸取或浸出。 应用： 用温水从甜菜中提取糖， 用有机溶剂从大豆、花生等油料作物中提取食用油， 用水或有机溶剂从植物中提取药物、香料或色素等。 液-固萃取 * 用溶剂从溶液中抽提物质叫液-液萃取，也称溶剂萃取。经典的液-液萃取指的是有机溶剂萃取 液-液萃取 有机溶剂萃取法广泛应用于抗生素、有机酸、维生素、激素等发酵产物工业规模的提取上。 应用 比化学沉淀法分离程度高； 比离子交换法选择性好、传质快； 比蒸馏法能耗低； 生产能力大、周期短、便于连续操作、易实现自动化控制 优点 * 溶剂萃取法和其他新型分离技术相结合，产生 了一系列新型分离技术： 超临界流体萃取（Supercritical fluid extraction） 反胶团萃取（Reversed micelle extraction） 双水相萃取技术（Partition of two aqueous phase system ）等。 用于高品质的天然物质、胞内物质（胞内酶、 蛋白质、多肽、核酸等）的分离提取上。 液-液萃取 * 一、基本概念 物理萃取 溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡而进行萃取的分离过程。 化学萃取 利用脂溶性萃取剂与溶质之间发生化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相分配的过程。萃取剂与溶质之间的化学反应包括离子交换和络合反应等。化学萃取中通常用煤油、己烷、四氯化碳和苯等有机溶剂溶解萃取剂，改善萃取相的物理性质，此时的有机溶剂称为稀释剂 diluent 。 * 二、萃取技术的操作特点 ① 萃取过程具有选择性 ② 能与其他纯化步骤相配合 ③ 通过转移到不同物理或化学特性的第二相中 减少由于降解引起的产品损失 ④ 可从潜伏的降解过程中分离产物 ⑤ 适用于各种不同的规模 ⑥ 传质速度快，生产周期短，便于连续操作 * 三、萃取需要考虑下列问题 ① 生物系统的错综复杂和多组分特性 ② 产物的不稳定性 ③ 传质速率 ④ 相分离性能 * 四、药物成分分离与精制方法 分离依据 分离方法 分离原理或特点 二相萃取法 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱法（DCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 液-液分配柱色谱 正相色谱和反相色谱 加压液相色谱法 正相色谱和反相色谱 快速色谱 低压液相色谱（LPLC） 中压液相色谱（MPLC） 高压(效)液相色谱法（HPLC） 分配系数（K）差异 * 溶解度差异 溶剂沉淀法 水提醇沉法（水/醇法） 除去多糖、蛋白质等水溶性杂质 醇提水沉法（醇/水法） 除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质 醇/醚（丙酮）法 皂苷的纯化（除去脂溶性杂质） 酸/碱法 生物碱的分离纯化 碱/酸法 酸性成分（如苷元）的分离纯化 试剂沉淀法 钙、钡、铅盐沉淀法 酸性成分的分离 生物碱沉淀试剂沉淀法 生物碱的分离纯化 结晶及重结晶 化合物的进一步精制 溶解度差异 * 1)物理吸附（表面吸附） 无选择性、吸附 可逆、可快速进行，应用较