猪圆环病毒2ORF2基因真核表达载体的构建.pdf

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2017-06-29 发布于贵州
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猪圆环病毒2ORF2基因真核表达载体的构建

第四次猪病学术研讨会会议论文集猪圆环病毒2型oI珂2基因真核表达载体的构建王子馨，陈红英，，崔保安·，刘金朋，王淑娟。朱前磊，王亚丹 (河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002) 摘要根据猪圆环病毒2型ORF2基因基因序列设计并合成l对特异性引物，以含猪圆环病毒2型ORF2基因的然后将酶切、回收的ORF2基因片段连接到同样处理的pIRES上，转化入大肠杆菌DH5a。所获重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定，证实含有目的片段，且连接，构建正确，表明Pcv2OI强2已连接到pIRES真核表达载体中，为猪圆环病毒2型Ol心2基因的生物学功能研究奠定基础。关键词猪圃环病毒2型oRF2基因；真核表达载体：构建 C0nstnlction vectorofPCV2ORF2Gene ofEllIcaryticExpression WANG Zi·xin，CHEN Bao一粕+，LIU Qi蛐-lei，WANGYa-d蚰。 Hong-ying，CUI Jin-peng，WANGSu．ju锄，ZHU ofAniIIlal (CoIlege Husbandry彻dvet丽蚰ry，Hen甜A鲥cultIlraluniversi吼Zhengzholl，He’nan450002，ChiIla) Abstract：Oneof was and tothenucleoticIc of circo们ms2 pairprimerSdesi星田edsynthesizedaccording sequencepofciIIe 0RF2 with (PCV2)ORF2genesequence．PCV2g明ew船amplifiedbyPCR recombiIlationplasmidpIRES．Ol己F2 PCV2ORF2as 0RF2was witllXhoIandMluI，insertedintoeukaryotic contailling genetemplate．PCV2gene d垃ested vector wimXhoIandMluI to recombin锄t identification expressionpII旺Sdigested constmct plasmidpIRES．ORF2．ARer ofrecombinam PCR加denzyme recombinants仃ainswere plasmidby digestion。positive sequenced．DNAsequencing resuhshowedthatthe oftherecombinant inthe fhmeand sequence eukan70ticexpressionplasmidpn己ES．0RF2readjng the werecorrect．Theresuhsshowedthattherecombinam wasconsn．ucted ligationpart plasmidpIRES．ORF2 correctl弘 which the formture of mnctionand of circovims2ORF2． pavedwav studvbiological apDIicationDorciIle KeVwords：PorcinecircovinIs20RF2：Eukaryoticexpressionvector：Consnllction 猪圆环病毒(P0rcine PMWS)的主目】河南省杰出人才创新基金项目(0621002100)muItisystemicw嬲tingsyndronle，要病原，PMWS呈世界