西瓜枯萎病菌拮抗枯草芽孢杆菌BTF发酵条件优化.pdfVIP

第27卷第1期 信阳农林学院学报 Vol。27No．1 of of and Mar．2017 2017年3月 Journal AgricultureForestry XinyangCollege 西瓜枯萎病菌拮抗枯草芽孢杆菌BTF发酵条件优化 李 萍1，刘 冬1”，代玉立3，高智谋2+ (1．安庆职业技术学院园林园艺系，安徽安庆246003；2．安徽农业大学植物保护学院，安徽合肥230036； 3．福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013) 摘 要：为提高拮抗细菌对西瓜枯萎病菌的拮抗作用．应用单因素和响应面对拮抗枯草芽孢杆菌发酵培养基及发酵条 件进行优化。结果表明，最适发酵培养基为葡萄糖20g／L、蛋白胨lOg／L，磷酸二氢钾5∥L。最佳发酵培养的时间为60h，初 始pH为7．O，接种量、培养温度和转速分别为9．95％、36℃和120r／rain。在该条件下进行验证，抑茵率为62．12％，可作为西 瓜枯萎病生物防治的潜在微生物制剂选项。 关键词：西瓜枯萎病菌；拮抗细菌；响应面；发酵条件优化 中图分类号：$436．42文献标识码：A 文章编号：2095-8978(2017)01-0099-05 尖孢镰刀菌西瓜专化型[Fusariumoxysporum etHansen]引起 的西瓜枯萎病是一种世界毁灭性的土传病害，该病于1894年Smiht首次报道，广泛分布于非洲、澳大利亚、 亚洲、欧洲、北美和南美等国家，现已上升为主要病害[1。3]。西瓜枯萎病防治十分困难，选育和利用抗病品种 是最经济有效的措施。目前生产上既抗枯萎病又高产优质的西瓜品种很少，常采用轮作换茬、嫁接和化学药 剂等方法防治枯萎病。实行多年轮作倒茬的农业措施，对减少病害传播虽能起到一定的作用，但有些地区土 地有限，轮作不易实施[41；嫁接栽培能明显降低枯萎病的发病率和病情指数，但费工费时并降低了西瓜的品 质和风味，限制了这一技术在生产实践中的广泛应用；化学药剂防治可以收到一定的效果，但成本高、用工 多，且造成农药残留和大气污染，使化学防治失去其应有的效力[5]。生物防治方法对环境友好，风险低，其 中，微生物源生物农药研究和开发十分活跃，但潜力尚没有得到充分的发挥，作为低毒性新型农药其具有重 要的开发价值‘6。7]。 目前，细菌中的芽孢杆菌属(Bacillus Slap．)，真菌中的绿色木霉(％． spp．)、假单胞杆菌属(Pseudomonas choderma viride)、哈茨木霉(Tfiehodermaharzianum)，放线菌中的链霉菌(Streptomyeesspp．)等对西瓜枯萎 P0ly． 酵后，发现对盆栽西瓜枯萎病的防效达67％。甘良等[12]开展了放线菌混合菌剂对西瓜枯萎病的防治作用 研究，结果发现混合菌剂对西瓜植株鲜重的提升和西瓜枯萎病的防治效果明显优于单个菌株。 本实验从健康的西瓜根际土壤中筛选一株对西瓜枯萎病菌具有较好拮抗作用的细菌BTF。经形态、生理 生化特征和16SrDNA序列鉴定为枯草芽孢杆菌。为进一步提高生防效果，采用单因素和响应面对拮抗细 菌的发酵培养基和发酵条件进行优化，对生防细菌的推广应用及抑菌活性物质的提取均有重要意义。 1材料与方法 收稿日期：2016—11—16 重点项目(gxyqZD2016516)． 作者简介：李萍(1985一)，女，安徽安庆人，副教授，博士，主要从事植物真菌病害研究． s通讯作者：高智谋(1957一)，男，安徽桐城人，教授，博士，主要从事植物真菌病害研究． ·98· 万方数据 李萍，等：西瓜枯萎病茵拮抗枯草芽孢杆菌BTF发酵条件优化 1．1供试材料 1．1．1 供试菌株枯草芽孢杆菌BTF(