密花石斛酸性多糖的生物活性及相对分子质量研究 - 南方医科大学学报.pdf

2010;30(4) 南方医科大学学报(JSouthMedUniv) 窑815 窑 密花石斛酸性多糖的生物活性及相对分子质量研究 李 雯袁向海艳袁丁宗保袁谢扬渊南方医科大学药学院药物化学系袁广东广州 510515冤 摘要院目的研究密花石斛酸性多糖的生物活性与其相对分子质量袁确定某一相对分子质量范围的多糖药效作用最好遥 方法密花石斛粗多糖过 -1 DEAE-52纤维素层析柱袁分别用(0.05尧0.1﹑0.2﹑0.3)mol窑L NaCl 洗脱得4 个酸性多糖渊PGM1﹑ PGM2﹑PGM3﹑PGM4冤袁利用凝胶过滤法通过SephadexG-100柱层析测出它们的各自相对分子质量遥 通过对小鼠脾细 胞增殖和对肿瘤细胞A549 和G2增殖的影响袁得出每个酸性糖之间的活性差异袁结合它们的相对分子质量综合比较分 析遥结果四个酸性多糖的药效作用不一袁整体比较作用大小为PGM4PGM2PGM3PGM1遥 结论有药效作用的物质 的相对分子质量集中在渊70000~50000冤﹑域区渊50000~28000冤﹑ 区渊10000~5000冤这三个区域袁其中以集中在 区的酸 性糖药效作用最强遥 关键词院密花石斛曰酸性多糖曰相对分子质量曰脾细胞曰抗肿瘤 中图分类号院R284.3曰R285.5 文献标识码院A 文章编号院1673-4254(2010)04-0815-03 密花石斛渊Dendrobiumdensiflorum冤袁别名黄花石 1.2 动物和细胞株 斛袁 为兰科石斛属植物遥 石斛属包括约 1100余种植 NIH小鼠袁 由南方医科大学实验动物中心提供曰 物袁 近几十年国内外学者对30多种石斛属植物的化 人肺癌A549 和肝癌G2细胞, 由南方医院消化科提 咱1-2暂 咱3暂 学成分 和药理作用 进行了研究袁结果表明石斛多 供遥 糖具有抗肿瘤尧增强免疫力尧降低血糖等作用咱4暂遥石斛 1.3 仪器与设备 属植物药理活性作用的强弱与其水溶性多糖含量之 紫外可见分光光度计渊普析通用仪器公司袁型号院 咱5-6暂 间存在正相关性 袁且植物中的酸性多糖往往具有 T6 系列冤曰 连续波长酶标仪 渊Bio-RAD公司袁 型号院 TM 较大的生物活性曰但是有关密花石斛水溶酸性多糖类 BenchmarkPlu 冤曰CO 培养箱渊Thermo公司袁型号院 2 的化学成分及其生物活性作用的研究鲜见报道遥本文 5410冤遥 对密花石斛酸性多糖进行实验研究袁将粗多糖进行分 1.4 密花石斛多糖提取工艺流程 离袁得到的几种酸性多糖袁首先在体外从免疫促进和 称取密花石斛 100g袁 加 10倍量去离子水渊1000 抗肿瘤两个重要方面研究其药效作用袁并进一步比较 ml冤袁90 益回流提取3次袁每次 1h遥 合并滤液浓缩至 各样品相对分子质量的大小和范围比重袁初步得出药 糖浆状袁按浓缩液体积比加入3倍量95%乙醇袁于4 效学作用与多糖相对分子质量的关系袁确定药效作用 益下冷藏过夜曰离心渊9000r/min袁15min冤袁取沉淀物袁 最好的相对分子质量范围遥 蒸馏水溶解遥Sevag法除蛋白渊反复多次袁直到检测无