聚乙二醇n末端定点修饰恩度的性质 - 《中国药科大学学报》！.pdf

学 报 ４７６ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１０，４１（５）：４７６－４８０ 聚乙二醇Ｎ末端定点修饰恩度的性质 １ １ １ １ ２ １ 童　癑 ，仲　恺 ，王西龙 ，姚文兵 ，许向阳 ，高向东 １ ２ （中国药科大学生命科学与技术学院，南京２１０００９；江苏先声药物研究有限公司，南京２１００４２） 摘　要　对聚乙二醇（ＰＥＧ）化恩度的性质进行了研究。肽图法用以验证ＰＥＧ修饰位点，结果表明ＰＥＧ修饰在恩度的 Ｎ末端。圆二色谱和色氨酸荧光谱分别用于检测ＰＥＧ化恩度的二级结构和三级结构，分析结果显示ＰＥＧ修饰并没有改变 蛋白质本身的结构。尿素诱导的解折叠和酶孵育法用以检测修饰后蛋白的体外稳定性，结果表明修饰后蛋白抗尿素解折 叠和抗酶解的能力提高。细胞抗增殖法检测表明修饰后蛋白保留了原有的生物学活性。研究结果表明ＰＥＧＮ末端修饰可 以增加恩度的体外稳定性并且保留原有的体外活性。 关键词　性质；恩度；定点；Ｎ末端；聚乙二醇 中图分类号　Ｒ９７９１　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１０）０５－０４７６－０５ ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＮｔｅｒｍｉｎａｌＰＥＧｙｌａｔｅｄＥｎｄｏｓｔａｒ １ １ １ １ ２ １ ＴＯＮＧＹｕｅ牞ＺＨＯＮＧＫａｉ牞ＷＡＮＧＸｉｌｏｎｇ牞ＹＡＯＷｅｎｂｉｎｇ牞ＸＵＸｉａｎｇｙａｎｇ牞ＧＡＯＸｉａｎｇｄｏｎｇ １ ２ ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牷ＪｉａｎｇｓｕＳｉｍｃｅｒｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＲ＆ＤＣｏ．牞 Ｌｔｄ．牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１００４２牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＮｔｅｒｍｉｎａｌｓｉｔｅｓｐｅｃｉｆｉｃＰＥＧｙｌａｔｅｄＥｎｄｏｓｔａｒｗａｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄＰｅｐｔｉｄｅｍａｐｐｉｎｇｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｓｈｏｗ ｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｍｏｎｏＰＥＧｙｌａｔｉｏｎａｔｔｈｅＮｔｅｒｍｉｎｕｓｏｆＥｎｄｏｓｔａｒＴｈｅｒｅｓｕｌｔｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＰＥＧｗａｓａｔｔａｃｈｅｄ ｔｏｔｈｅＮｔｅｒｍｉｎｕｓｏｆＥｎｄｏｓｔａｒＣｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｔｒｙｐｔｏｐｈａｎｅｍｉｓｓｉｏｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏ ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙａｎｄｔｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＰＥＧｙｌａｔｅｄＥｎｄｏｓｔａｒＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎａｌｙｓｉｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＰＥＧｙｌａ ｔｉｏｎｄｉｄｎｏｔｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙａｎｄｔｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＥｎｄｏｓｔａｒ Ｉｎｖｉｔｒｏｓｔａｂｉｌｉｔｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｓｕｃｈａｓｕｎｆｏｌ ｄｉｎｇｉｎｄｕｃｅｄｂｙｕｒｅａａｎｄｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｒｙｐｓｉｎ牞ａｓｗｅｌｌａｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｅｘａｍｉｎｅｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆＰＥＧｙｌａｔｅｄＥｎｄｏｓｔａｒＰＥＧｙｌａｔｅｄＥｎｄｏｓｔａｒｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｔａｂｉｌｉ ｔｙａｇａｉｎｓｔｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎｂｙｕｒｅａａｎｄｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｂｙｐｒｏｔｅａｓｅｗｈｉｌｅｒｅｔａｉｎｉｎｇｉｔｓａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉ