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噬菌体污染防治 病毒(Virus) Why beginning with Virus? 噬菌体档案 噬菌体（Bacteriophage） 噬菌体的特性 噬菌体个体小，可通过除菌滤器 噬菌体的繁殖 烈性噬菌体的繁殖 温和噬菌体的繁殖 噬菌体的危害 噬菌体的危害 T1-Phage污染对公司生产的影响 本社および Clontech に謝罪状 噬菌体防治 噬菌现象 噬菌斑 噬菌体污染或溶源菌裂解的鉴定方法 目前公司噬菌体污染的防治措施 大肠杆菌操作及灭废菌专门房间 使用抗噬菌体的菌株 其他防治要点 消除潜在的污染隐患-1 消除潜在的污染隐患-2 消除潜在的污染隐患-3 消除潜在的污染隐患-4 消除潜在的污染隐患-5 消除潜在的污染隐患-6 消除潜在的污染隐患-7 消除潜在的污染隐患-8 消除潜在的污染隐患-9 消除潜在的污染隐患-10 消除潜在的污染隐患-11 消除潜在的污染隐患-12 噬菌体相关消毒及灭菌方法 物理因素对病毒的影响 化学因素对病毒的影响 紫外线照射灭菌 紫外线杀菌安全吗？ 紫外线杀菌的注意事项 臭氧杀菌 公司目前主要消毒房间一览表 分光光度计周围： 菌体相关的废液建议收集到专门密闭容器，每日灭菌； 盛放过菌液的比色皿应注意清洗，清洗液同上处理。 高压灭菌后的枪头，务必烘干使用 玻璃器皿特别是菌体培养用器具使用前用铝箔包裹后，在180℃干热灭菌。 培养装置应经常清洗消毒； 水浴摇床中的水要经常更换，长时间不用要将水排空，擦拭干净放置。 在培养时最好使用无菌的棉塞（不要使用铝箔覆盖培养瓶）；不要使用潮湿或脏的瓶塞。 灭菌时 培养时 接触菌体频率高，空隙多容易隐匿菌体的器具要经常清洗消毒。 Stands Centrifuge it’s rotor 脏的移液器 反复使用的电击槽 与噬菌体污染的培养液接触过的电极或buffer 温度: 大多数病毒耐冷不耐热。反复冻融可致许多病毒灭活，不同病毒对热的耐受性有很大不同，一般包膜病毒比无包膜病毒更不耐热，包膜病毒56 degrees可迅速灭活。 pH: 多数病毒在pH6~9范围内比较稳定，在pH5.0以下或PH9.0以上迅速灭活。 射线: γ射线、x射线及 紫外线都能灭活病毒。 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 灼烧 碱性pH溶液处理 UV照射灭菌 噬菌体污染的消除办法 脂溶剂：对包膜病毒有作用 酚类及醛类酚及其衍生物：为蛋白质变性剂，能破坏病毒衣壳蛋白，故可作为病毒消毒剂。 氧化剂、卤素及其化合物：70％的甲醇及乙醇均可使多数病毒灭活。过氧乙酸可使乙肝病毒灭活。 噬菌体污染的消除办法 甲醛溶液处理 甲醛蒸汽熏蒸 O3熏蒸 二氧化氯熏蒸 二氧化氯溶液处理 普通30W直管型紫外线灯，辐射强度(垂直1m处)应≥70μW /cm2。 一般而言，即使是最顽强的细菌与病毒，在30,000 μ W.sec/cm2的照射剂量内都会无所遁形。 紫外线杀菌就是通过紫外线的照射，破坏及改变微生物的DNA结构，使微生物当即死亡或不能繁殖后代，达到杀菌的目的。 真正具有杀菌作用的是UVC紫外线（254nm） 紫外线灯应该照射多长时间？ 剂量(μW·s/cm2)＝强度(μW/cm2) × 时间(s) 每一种微生物都有其特定紫外线杀灭剂量标准。 正常情况下，生物安全柜每次使用完，打开紫外灯，保持风机继续工作30min； 如果发生了噬菌体污染，可用紫外灯过夜杀菌。 穿透力强 伤害小 穿透力弱 伤害大 可以穿透大部分透明的玻璃以及塑料 超过98%能穿透臭氧层和云层到达地球表面 波长较短的部分会被透明玻璃吸收 大部分被臭氧层吸收，不足2%能到达地球表面 无法穿透大部分的透明玻璃及塑料 几乎被臭氧层 完全吸收 选购紫外线灯管时注意：选择石英管，发光谱线254nm的。 石英灯管使用一段时间后会逐渐老化，紫外线照射强度会发生衰退，为达到彻底消毒的效果，应定期检查更换石英灯。 紫外线只能沿直线传播，穿透能力弱，消毒时尽量应使消毒部位充分暴露于紫外线下，定期擦拭灯管，以免影响紫外线穿透率及照射强度。 4. 紫外消毒后的微生物易发生光复活，在适宜的环境下增殖。因此应与化学消毒剂（氯、过氧乙酸、臭氧等）配合使用联合消毒。 臭氧作为一种绿色消毒剂，对大肠杆菌、乙肝病毒、感冒病毒、腐菌、霉菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等具有极强的灭活效果，其灭菌速度是紫外线的3000倍。 臭氧（O3） 次氯酸（HCLO） 二氧化氯（CLO2） 银离子（Ag+） 次氯酸根（CLO） 高铁酸盐（Fe3+） 氯胺（NHCl3）。 臭氧安全吗？ 臭氧的杀灭效果？ 活人体在1hr下就陷入生命危险状态 50ppm 引起强烈咳嗽，允许接触时间为20分钟。 4-10ppm 引起人员咳嗽，允许