细菌卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥菜中的高效表达3-应用生态学报.PDFVIP

应 用 生 态 学 报 　1999 年 2 月 　第 10 卷 　第 1 期 　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 CHIN ESE J OU RNAL OF A PPL IED ECOL O GY ,Feb . 1999 ,10 ( 1) ∶83～85 细菌卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥菜中的高效表达 (沈阳师范学院生物系 ,沈阳 110034) 郝 　林 　 ( Φ ) John Mundy 　Cop enhagen University , ster Farimagsgade 2A ,1353 Cop enhagen K , Denmark 【摘要】　报道了细菌 X ant hobacter autot rop hicus 编码卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥菜中的高效表达. 以土壤农 杆菌介导将该基因整合到拟南芥菜基因组中 ,经数代筛选得到了转基因纯合种子 ,Nort hern 印迹和气相色谱检 测表明 ,转基因的表达程度很高 ,酶量占细胞总可溶性蛋白的 8 % ,酶活力达 7 . 8mU ·ml - 1 提取物. 转基因植株 在含二氯乙烷的培养基上不能生长. 关键词 　卤代烷烃脱卤酶基因　拟南芥菜 　基因表达 　土壤农杆菌 Eff icient expression of bacterial haloalkane dehalogenase gene in A r abi dopsis t h ali an a . Hao Lin ( B iolog ical Dep art ment , S heny ang N orm al College , S heny ang 110034) and John Mundy ( I ns tit ute of M olecular B iology , Cop enhagen Φ ) ( ) University , s ter Fari m agsg ade 2A , 1353 Cop enhagen K , Denmark . Chin . J . A pp l . Ecol . , 1999 , 10 1 : 83 ～ 85. This p ap er dealt wit h efficient expression of haloalkane dehalogenase gene ( dhlA ) from X ant hobacter autot rop hicus in A rabidopsis t haliana . The dhlA was transferred and integrated into genomes of A . t haliana mediated by A g robac teri u m t u mef aciens , and homozygous dhlA seeds were obtained after several generations selection on a sp ecial medi um . Nort hern blotting and gas chromatograp hy ( GC) assay shows t hat t he dhlA was expressed efficiently , t he amount