培养基的成分和制作.docxVIP

培养基的成分和制作（1）革兰氏染色1)试剂：草酸铵结晶紫、碘-碘化钾溶液、乙醇(或丙酮酸)、蕃红溶液(沙黄)(2)过氧化氢酶试验1)试剂：3%过氧化氢溶液：临用时配制。3.明胶液化试验：1)培养基成分：蛋白胨5g、牛肉膏3g、明胶120g、蒸馏水1000mL2)培养基的制作：将上述成分混合，置流动蒸气灭菌器内，加热溶解，校正pH至7.0～7.2，用绒布过滤。分装试管，121℃灭菌15min，备用。淀粉水解试验1)培养基成分：牛肉膏 0.5g、蛋白胨 1g、氯化钠 0.5g、可溶性淀粉 0.2g、水 100mL、琼脂 2g；其他成分：革兰碘液2)培养基的制作：先用少量冷水将淀粉调成糊状，在火上加热，边搅拌边加水和其他成分，溶化后将水补足到100ml。调剂pH 7.0～7.2，灭菌 1.05kg/cm2，121.3℃，20min5、吲哚试验1)培养基成分：胰酪蛋白胨10g、氯化钠5g、L-色氨酸0.5g、蒸馏水100ml、pH值7.3-7.52)培养基制作：加热溶解于100ml蒸馏水中,调剂pH，分装试管,121℃高压灭菌15分钟备用。V-P试验1)培养基成分：葡萄糖5g、K2HPO42g、蛋白胨5g2)培养基制作：将上述材料完全溶解于1000ml水中后，分装试管内，间歇灭菌或10磅10分钟灭菌。苯丙氨酸脱氨试验1)培养基成分：氯化钠5g 、酵母浸膏3g 、琼脂12g 、Na2HPO4 1g、蒸馏水1000ml2)培养基制作：将上述材料在烧杯中加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面酪氨酸水解1)培养基成分：蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、琼脂15.0g、pH值7.3?±?0.1、25℃、蒸馏水1000ml2)培养基制作：将上述材料加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶 ,121℃高压灭菌 15分钟,备用。将L－酪氨酸0.5g悬浮于10mL蒸馏水中，8磅20分钟灭菌，然后与100mL无菌的营养肉汤琼脂混合，倾倒平板，待凝固后。9、尿素酶试验1)培养基成分：蛋白胨1g、葡萄糖1g、氯化钠5g、KH2PO4 2g 、0.2％酚红溶液 6ml、琼脂20g 、蒸馏水1000ml 2)培养基的制作：依次加入上述材料溶解于水中加热溶解，调节pH至6.9后分装，在121℃高压灭菌15分钟，冷却到55℃时加入十分之一的20％尿素液，(经滤过法除菌)，使尿素含量为2％(即每1000ml中有20g)卵磷脂酶试验1)培养基成分：肉浸液1000mL、蛋白胨15g、氯化钠5g、琼脂25～30g、pH7.5、50%葡萄糖水溶液2ml、50%卵黄盐水悬液10~15ml。2)培养基制作：将肉浸液、蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶解后，分装每瓶100mL。121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每瓶内加入50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黄盐水悬液10～15mL，摇匀，倾注平板。11、柠檬酸盐(CIT)利用试验1)培养基成分：柠檬酸钠 2g、K2HPO4 1g、NH3H2PO4 1g、NaCL 5g、MgSO4 0.2g、琼脂 15-20g、1%溴麝香草酚蓝(酒精溶液)或0.04%苯酚红 10ml、水 1000ml2)培养基制作：将上述各成分加热溶解后，调PH6,8，然后加入指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色，分装试管。121℃灭菌20min后制成斜面。D-葡萄糖氧化发酵试验1)培养基成分：蛋白胨 1g、牛肉膏 0.3g、氯化钠 0.5g、1.6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL、D-葡萄糖 1g、琼脂 0.3g、蒸馏水 100mL、pH7.42)培养基制作：将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正pH后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和葡萄糖，分装小试管，灭菌121℃ 15 min。（13).D-木糖氧化发酵1)培养基成分：蛋白胨 1g、牛肉膏 0.3g、氯化钠 0.5g、1.6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL、D-木糖 1g、琼脂 0.3g、蒸馏水 100mL、pH7.42)培养基制作：将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正pH后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和木糖，分装小试管，灭菌121℃ 15 min。（14)D-甘露醇氧化发酵1)培养基成分：蛋白胨 1g、牛肉膏 0.3g、氯化钠 0.5g、1.6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL、D-甘露醇1g、琼脂 0.3g、蒸馏水 100mL、pH7.42)培养基制作：将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正pH后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和甘露醇，分装小试管，灭菌121℃ 15 min。（15)酪素水解试验1)培养基成分：脱脂奶粉5g、蒸馏水100ml、琼脂1.5g2)培养基制作：取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中(或用50mL脱脂牛奶)，另称1.5g琼