查氏TBSLB培养基等培养基的制备.docVIP

1. 查氏培养基-- Czapek–Dox Medium 蔗糖 30 g，NaNO3 3 g，K2HPO4 1 g， KCl 0.5 g， MgSO4· 7H2O 0.5 g，FeSO4 · 7H2O 0.01 g，琼脂 15 g，水 1000 mL，并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。121℃灭菌 20 min，冷却后备用。液体培养基不加琼脂，用于菌种的扩大培养。 成分 硝酸钠　3g 磷酸氢二钾　1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O)　 0.5g 氯化钾　0.5g 硫酸亚铁　0.01g 蔗糖　30g 琼脂　20g 蒸馏水　1000mL 制法 加热溶解，分装后121灭菌20min。 用途 青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。 --牛肉膏蛋白胨培养基： (牛肉膏 5g, 蛋白胨 10g, NaCl 5g, H2O 1000mL, pH 调至 7.2 ~7.4。) 胰蛋白胨 15 g，大豆蛋白胨 5 g，NaCl 5 g，牛肉膏 5 g，琼脂 15 g，水 1000 mL，并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。121℃灭菌 20 min，冷却后备用。液液体培养基不加琼脂，用于菌种的扩大培养。 3. LB 培养基---细菌基础培养基 (Tryptone 10g, Yeast extract 5g, NaCl 10g, 水1000mL, pH 调至 7.2 ~7.4。 ) 胰蛋白胨 10 g，酵母提取物 5 g，NaCl 5 g，琼脂 15 g，水 1000 mL，并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。121℃灭菌 20 min，冷却后备用。液体培养基不加琼脂，用于菌种的扩大培养。 4、soc培养基---改良的LB培养基 SOC培养基 组份浓度：2% (W/V) Tryptone ，0.5% (W/V) Yeast Extract ，0.05% (W/V) NaCl ，2.5 mM KCl 10 mM MgCl2，20 mM glucose。 配制量：100 ml 配制方法 1. 配制1 M 的glucose溶液：将18 g的glucose溶解在90 ml的去离子水中，定容至100 ml，用0.22 μm滤膜过滤除菌。 2. 向100 ml SOB培养基中加入除菌的1 M glucose溶液2 ml，均匀混合。 3.调节ph值等于7。 4. 4℃保存。 作用：含营养较之LB培养基更为丰富，可用于电转化后的感受态细胞的复苏。 优点：配好后分装，放在-20℃的低温冰箱中保存，因是分装，可以避免因取液而发生的污染，可以保存很长时间。 SOB培养基---（Super Optimal Broth） 配制每升培养基，在950ml去离子水中加入： 胰化蛋白胨 20g 酵母提取物 5g NaCl 0.6 g 摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol/L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L KOH 调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在121℃高压蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前，加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2溶液的配制方法如下：用90ml去离子水溶解19g MgCl2，用去离子水调整体积为100ml，在121℃高压下蒸汽灭菌20min]。[1] 用途：比LB的营养更加丰富，可增加转染效率。 5、 微囊藻培养基： BG11 培养基 (BG11 medium)，配方如下： NaNO3 150mg K2HPO4 4mg MgSO4?7H2O 7.5mg CaCl2?2H2O 3.6mg Na2SiO3?9H2O 5.8mg 柠檬酸 0.6mg 柠檬酸铁铵 0.6mg EDTA 0.1mg Na2CO3 2mg *A5 Solution: 0.1mL Distilled water 99.9mL *A5 Solution: H3BO3 286mg MnCl2?4H2O