高效液相色谱紫外检测法测定饲料中N-氨甲酰谷氨酸的含量.pdfVIP

2016年第 17期 中国饲料 DOI：10．15906／j．cnki．cn11—2975／s 高效液相色谱紫外检测法测定饲料中 N一氲甲酰谷氨酸的含量 李 裕 (湖南省兽药饲料监察所 ，湖南长沙 410006) 摘『要]本实验建立了高效液相色谱紫外检测法测定饲料 中N一氨 甲酰谷氨酸含量的方法。配合饲料样品用水提 取后经混合型阴离子固相萃取柱净化富集 。以甲醇一0．05％磷酸水溶液(V／V，5：95)为流动相 ，c 色谱柱分离，检测波 长215nm。结果表明，在 1．5～500p,g／mL浓度范围线性关系良好 ，R：1，样品回收率为88．6％～101．2％，相对标准 偏差为 O．69％～2．31％(：5)，定量限为O．075mg／g。可见本方法适用于饲料 中N一氨 甲酰谷氨酸的含量测定。 关『键词1饲料 ；N一氨 甲酰谷氨酸 ；高效液相色谱 [中图分类号]$816．17 文【献标识码]A [文章编号】1004-3314(2016)17-0041—03 A【bstract】Ahighperformanceliquidchromatography (HPLC)methodwasdevelopedforthequantitationofN—ear— bamylglutamateinfeed．Samplewasextractedwithwater，andpurifiedbyanionexchangeSPEca~fidge．TheHPLCsepara— tionwasachievedonaC18columnusingamobilephaseofmethanolandO．05％ phosphoricacidaqueoussolution (V：V 5：95．TheUVdetectorwasoperatedat215am．Themethodprovidedgoodlinearityfrom 1．5I~g／mLto500p~gm／L(R2=1)． rherecoverieswereintherangeof88．6％ 一101．2％ andtherelativestandarddeviations (RSDs)wereintherangeof 0．69％ ～2．31％(n=5)．Thequantificationlimitwas0．075mg／g．Itwasasimple，rapidandreliablemethodforthedetemri— nationofN-carbamylglutamateinfeed． K【eywords]feed；N-carbamylglutamate；highperformanceliquidchromatography N一氨 甲酰谷氨酸是 N一乙酰谷氨酸的稳定 等因素 ，定量可能不如高效液相色谱紫外检测法准 结构类似物 ，能激活动物体 内氨 甲酰磷酸合成 确。因此 ，本实验旨在建立一种适用于大多数饲料 酶一I和二氢吡咯一5一羧酸合成酶 ．从而促进精 企业实验室使用，能准确测定饲料中N一氨甲酰谷 氨酸的生成 。精氨酸在调控动物机体营养代谢 氨酸含量的方法。 和免疫反应方面有重要作用 ，可提高多胎动物 1 材料与方法 窝产仔数和初生重 、促进幼龄动物生长和发育 1．1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪配 2489 (Wu等 ，2004)。N一氨 甲酰谷氨酸的成本仅为精 型紫外检测器、2998型二极管阵列检测器 (美 国 氨酸 的 1／10(冯涛等 ，2012)。 目前含有 N一氨 甲 Waters公司)；Delta320型 pH计 (梅特勒一托利多 酰谷氨酸 的饲料产 品主要有饲料添加剂和配合 公司)；OASISMAX固相萃取柱 (150mg，6cc，美 饲料两大类。 国Waters公司)。 目前报