大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究 .docVIP

　　大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究 【摘要】 　　目的利用AB8大孔吸附树脂纯化黄连、关黄柏中季铵总碱,确定树脂纯化季铵总碱的工艺参数。方法以季铵总碱和盐酸小檗碱吸附量为指标，并通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化季铵总碱的工艺条件。结果AB8 型树脂对季铵总碱有良好吸附分离性能,其吸附分离季铵总碱的工艺条件为：上样浓度为50 mg/ml（生药量），上样液pH值为8，吸附流速为3BV/h ,上样体积为5BV，洗脱剂为5倍量树脂柱体积50%乙醇。结论AB8 型大孔吸附树脂在所确定的工艺条件下,纯化季铵总碱效果良好，季铵总碱的纯度可达90%。 【关键词】 季铵总碱 大孔吸附树脂 纯化 　　Abstract：ObjectiveTo set up a method for purification of total quaternary ammonium hydroxide from Coptis chinensis Franch.and Phellohendron amurense Rupr.by AB-8 macroporous resin . Methods The technical process for purification of total quaternary ammonium based on AB-8 macroporous resin ic absorption ratio through orthogonal tests.ResultsThe AB - 8 macroporous resin oum absorption and elution ability.The optimum absorption conditions ple concentration g ·ml-1， the PH of sample acroporous resin can be used to purify total quaternary ammonium hydroxide successfully.The purity of total quaternary ammonium hydroxide is about 90 %. 　　Key monium hydroxide; Macroporous resin; Purification 　　黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.三角叶黄连 Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao.或云连Coptis teeta ETTLER AE240分析天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司)；紫外可见分光光度计；THZ-C摇床(江苏太仓市华美生化仪器厂)；Sartorius BP2112D 型电子天平(德国赛多利斯公司)；BUG25212 型超声波清洗机。 　　1.2 试药 　　黄连、关黄柏药材(购自江苏省江扬国药有限公司)；盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所提供)；树脂AB－8，S-8，NKA-9，X-5(南开大学化工厂)；高效液相用甲醇为色谱纯；高纯水；其它试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 含量测定 　　2.1.1 紫外分光光度法 　　精密称取盐酸小檗碱3.6 mg，加水定容至50 ml。分别精密吸取标准溶液10，5，2.5 ml，定容至50 ml，为溶液A，B，C。分别精密吸取A溶液10，7.5，5 ml,定容至50 ml，为溶液D，E，F。精密吸取B液5ml，定容至50ml，为溶液G。精密吸取以上溶液及蒸馏水10.0 ml置带塞三角烧瓶中，加pH10缓冲液5.0 ml，加水33.0 ml，苦味酸钠2.0 ml，摇匀，超声波振荡20 min，精密加入二氯乙烷10.0 ml，振荡3 min，置分液漏斗内静置分层，以干燥滤纸滤过，按分光光度法（《中国药典》2005版Ⅰ部附录VA），以10.0 ml蒸馏水处理的溶液作为空白，于361 nm处测定吸光度。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：Y=0.082 9X-0.030 6, r=0.999 8，线性范围为0.72～14.40μg/ml，样品测定后按此回归方程计算。 　　2.1.2 高效液相色谱法 　　色谱条件：色谱柱为sinochrom C18（250 mm×4.6 mm ,5 μm) ；柱温40.0℃；流速1.0 ml/min;流动相为甲醇∶水(31∶69)，每1 000 ml水溶液含3.3 ml三乙胺和140 ml36%乙酸 ;测定波长365 nm；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算不低于2 500。标准曲线的制备：精密称取盐酸小檗碱对照品2.0 mg, 加甲醇定容至10 ml,摇匀，作为对照品溶液。精密吸取对