白细胞介素32与阿尔茨海默病关联性研究.pdfVIP

目录 中文摘要………………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………………2 缩略词表………………………………………………………………………………4 正文……………………………………………………………………………………5 第一章 引言………………………………………………………………………5 第二章 材料和方法………………………………………………………………7 1 实验材料……………………………………………………………………7 2 实验方法…………………………………………………………………..10 3 统计学处理方法…………………………………………...………..…….19 第三章 结果……………………………………………………………………..…20 1 U251 细胞形态学观察结果……………………………………………20 2 MTS 法测不同浓度Aβ42对U251 细胞存活率的影响…………………..20 3 提取mRNA 的检测结果…………………………………………………….22 4 IL-32及TNF- α的mRNA 表达水平……………………………………….22 5 IL-32mRNA 与TNF- αmRNA 表达水平相关性分析………………25 6 IL-32及TNF- α蛋白表达水平…………………………………………..26 7 IL-32 蛋白表达水平与TNF- α蛋白表达水平相关性分析……………..29 第四章 讨论………………………………………………………………………..30 第五章 结论………………………………………………………………………..34 参考文献……………………………………………………………………………..35 致谢…………………………………………………………………………………..38 综述…………………………………………………………………………………..39 万方数据 白细胞介素32 与阿尔茨海默病关联性研究 中文摘要 【目的】 通过用Aβ 处理人胶质瘤细胞株U251 细胞，观察IL-32 在U251 中表达情况，并通过检测TNF-α 的表达量分析IL-32 与TNF-α 的关系，以期对 阿尔茨海默病的炎症机制研究提供参考作用。 【方法】 血清饥饿法处理U251细胞，用不同浓度Aβ42 （0ug/ml、5ug/ml、 10ug/ml 、20ug/ml、30ug/ml，40ug/ml ）刺激U251 ，MTS测存活率，选择半数存 活率浓度作为最适浓度用于后续实验。用最适浓度Aβ处理U251 0h、6h、12h及 24h，提取各组细胞总RNA，逆转录成cDNA，利用Real-time PCR方法检测IL-32 和TNF-α mRNA表达水平；提取各组细胞总蛋白，Western blot法检测IL-32 和 TNF-α蛋白表达量。 【结果】 Real-time PCR 检测结果显示：IL-32 mRNA 表达水平及 TNF-α mRNA 表达水平均升高，差异具有统计学意义（P ＜0.01，vs control ）。与TNF-α 相比，各组IL-32mRNA 表达量均比TNF-α 高 （P ＜0.01 ），且药物处理组IL-32 变化较TNF- α更显著（P ＜0.01 ）。Western blot 法检测结果显示，与正常组相比， 30ug/ml 浓度的Aβ 作用于U251 细胞6h、12h，2