实验二.蛋白质两性反应与等电点测定.ppt

实 验 二蛋白质的两性反应与等电点测定; 了解蛋白质的两性解离性质 掌握测定蛋白质等电点的方法;P; 在等电点时蛋白质颗粒上的净电荷为零，缺乏同电相斥的因素，蛋白质溶解度最小，最容易析出沉淀; 本实验配制了各种不同pH值的缓冲液，沉淀出现最多的缓冲液pH值即为酪蛋白的等电点;实验器材与试剂; 蛋白质的两性反应（1）; 蛋白质的两性反应（2）; 蛋白质的两性反应（3）; 溶液呈蓝色 ; [H+] ，沉淀 ; 继续加酸，[H+]继续增大，pH＜pI。酪蛋白所带正电荷不断增加，同电相斥，沉淀溶解; [OH-] ，沉淀 ; 继续加碱，[OH-]继续增大，pH﹥pI。酪蛋白所带负电荷不断增加，同电相斥，沉淀溶解;结论 1：; 取7支同样规格的干燥试管，精确加入各试剂; 向每个试管中各加0.5%酪蛋白溶液20滴， 加一管，立即混匀一管 ;;结论 2：; 什么是蛋白质的等电点？ 在等电点时，蛋白质溶液为什么容易发生沉淀？ ; 实验项目 实验原理 试剂和器材 操作方法（主要步骤） 结果分析 思考题; 实验三 凝胶过滤分离高铁血红蛋白与高铁氰化钾