ATR-Chk1-Cdc25信号通路参与盘基网柄菌G2M转变期的调控.pdfVIP

第 1 期 No.1 华东师范大学学报(自然科学版) 2014 年 1 月 ]ournal of East China Normal University (Natural Science) ]an. 2014 文章编号:1000-5641(2014)01-0116-07 ATR-Chkl-Cdc25 信号通路参与 盘基网柄菌 G2/M 转变期的调控 程小凤， 侯连生 (华东师范大学生命科学学院，上海 200062) 摘要:显微镜观察盘基网柄菌野生型 KAx-3 细胞和突变型 RNAi-allC 细胞，计数结果表明后者 的单细胞繁殖速度约为前者的 8 倍.为探究该突变型盘基网柄菌细胞周期缩短的原因，用荧光 定量 PCR 和 western blot 研究了 ATR-Chk1-Cdc25 信号通路在其中的可能作用.实验结果表 明 :RNAi-allC 细胞中 cdc25 基因相对表达量约为 KAx-3 细胞的 8 倍，而其 Chk1 与 ATR 基因 的相对表达量却明显低于 KAx-3 细胞.突变细胞中 Cdc25 蛋白含量高于 KAx-3 细胞，但其 Chk1 蛋白含量却显著低于 KAx-3 细胞.这些数据表明，两种类型细胞之间的 ATR、 Chk1 、 Cdc25 在 mRNA 水平和蛋白表达上均存在差异，特别是 ATR 基因表达量的不同明显影响 ChK1 和 Cdc25 的表达量，提示 ATR-Chk1-Cdc25 信号通路应该在一定程度上参与了盘基网柄 菌细胞周期 G2/M 期的调控. 关键词: ATR-Chk1-Cdc25 信号通路; G2/M 细胞周期; Q-PCR; Western blot; 盘基网 柄菌 中图分类号: Q952.6 文献标识码: A 001:10. 3969/j. issn. 1000-5641. 2014. 0 1. 014 ATR-Chkl-Cdc25 involved in the regulation of Dictyostelium discoideum during G2/M cell cycle CHENG Xiao-feng , HOU Lian-sheng (School of Life Science. East China Normal University. Shanghai 200062. China) Abstract: The cell proliferatron of wild type KAx-3 and mutant type RNAi-allC observed by light microscope and cell counting. The latter was divided 8 time faste than the former. To eval uate the reason why RNAi-allC cell cycle shortened. the function of ATR-Chk1-Cdc25 signaling pathway were explored by quantitative PCR and western blot techniques. The results showed the differences of ATR , Chk1 , Cdc25 in mRNA contents and protein level existed in KAx-3 and RNAi-allC cells , that is , the expression of ATR and Chk1 ratio