HLH缺失型Id2在酵母双杂交系统中的表达及自激活检测.pdfVIP

410· 修 学 院 学 报 2007 Dec · Acad J PLA Postgrad Med Sch … ，，28(6) HLH缺失型Id2在酵母双杂交系统中的表达及自激活检测 伍志强，韩为东，赵亚力，杨 洁，田丽媛，司艺玲 (解放军总医院分子生物室北京 100853) [摘要] 目的：构建HLH结构域缺失的DNA结合抑制因子(Id2)诱饵质粒，并检测其在AH109酵母中的表 达及表达产物对酵母的有无毒性作用和对报告基因的有无转激活作用。方法：用重叠延伸PCR方法将Id2中的 HLH结构域缺失，并插入到pGBKT7载体，构建BD：Id2-DBM-BHLH融合诱饵质粒，将构建成功的诱饵质粒转化 AH109感受态酵母菌中，检测其是否具有自激活作用及对酵母的毒性作用，用Western blot方法检测其在酵母中表 达的融合蛋白。结果：成功构建Id2的HLH缺失体，I