梅毒诊断试剂的原材料.PDFVIP

为开发商业梅毒诊断试剂的原材料 为检测IgG，IgM和IgA抗体而设计的重组梅毒螺旋体抗原 梅毒是一种性传播疾病，如果不及时治疗，可能会导致非常严重的并发症。较早的诊断方法 （非梅毒 螺旋体检测）已经基本上被使用特异的梅毒螺旋体抗原所开发出来的新方法所取代了，它们包括快速 诊断，酶标和化学发光等新方法。这些新的筛选检测方法可以检测针对梅毒螺旋体的IgM，IgG和IgA抗 体。新的抗体检测试剂使用梅毒螺旋体天然抗原或重组抗原，重组抗原主要是梅毒螺旋体的Tp17， Tp15，Tp44.5 (TmpA)，和Tp47 。 梅毒是由梅毒螺旋体引起的性传染病，它是通过直接的性行为 梅毒螺旋体 接触病人梅毒溃疡而传播，其引起的全身性症状则大相径庭， 完全取决于疾病感染的阶段 （初次，继发，潜伏，或反复）。 梅毒螺旋体不能通过培养分离，所以血清学诊断，如基于酶联 方法的 IgG和IgM抗体的测定则在梅毒诊断和治疗中起主导的作 用。 梅毒的血清学检测有两个主要类别： （1）检测梅毒螺旋体抗原 或针对梅毒螺旋体的抗体 （2 ）非梅毒螺旋体检测，它是检测感 染的间接指征，如心磷脂 （一种线粒体膜的脂蛋白）的存在， 当梅毒螺旋体破坏细胞时它会被被释放出来。由于非梅毒螺旋 体检测不直接检测细菌，它们缺乏特异性，阳性结果的确认还 材料来源 Copyright © 2006 Pearson Education, Inc. Publishing as Benjamin 需要通过梅毒螺旋体特异试验，如酶联法检测梅毒螺旋体的IgG， Cummings IgM和IgA抗体。 目前，有几个具有高度免疫原性的脂蛋白已被确定为在梅毒感 染的各个阶段具有重要的诊断意义，它们包括Tp 17 ， Tp15, Tp44.5 (TmpA)，Tp47 ，Tp41和Tp35 (TmpC) 。尤其重要的是，机 体的早期免疫应答是针对TpN47和一些鞭毛蛋白，随后是Tp 15 和Tp17。由于这个原因，一些商业测试厂家已经开发了使用包 括这些具有免疫原性脂蛋白的重组抗原的新型试剂，它已被证 明是具有高度敏感性和特异性的并且可以准确地诊断活动性或 潜伏的梅毒感染。 迈迪安公司提供一系列的梅毒螺旋体抗原，其中还包括一个新 型的Tp17/Tp 15/Tp44.5/Tp47重组嵌合抗原。这四种抗原重组嵌 合抗原是通过大肠杆菌表达，并已经被用于开新型的酶联免疫 和快速诊断的免疫诊断试剂。 迈迪安公司通过大肠杆菌表达的各种梅毒螺旋体(T. PALLIDUM) 的重组抗原 Tp17/Tp15/Tp44.5/Tp47 重组嵌合抗原 Tp41 R01549 嵌合蛋白, 分子量64 kDa R01529 全长蛋白, β-gal tag,分子量153 kDa Tp15 Tp47 R8A101 全长蛋白, β-gal tag,分子量60 kDa R8A403 全长基因, β-半乳糖苷酶标签, 分子量92 kDa R01531 镶嵌蛋白, His tag,分子量19 kDa R01568 镶嵌蛋白, 多聚组氨酸标签, 分子量~45 kDa Tp17 TmpA (Tp44.5) R8A201 全长蛋白, β-gal tag,分子量63 kDa R8A404 全长蛋白, β-gal tag,分子量82kDa R01528 镶嵌蛋白, β-gal tag,分子量137 kDa R01530 氨基酸23-41 和288-325, GST tag,分子量32 kDa 应用 梅毒螺旋体的基因全长为114万碱基对，从理论上讲与其对应的应该有1,041个蛋白 （基因组测序项目）。多项免 疫学研究证明梅毒螺旋体的不同菌株还可以表达不同梅毒螺旋体蛋白(Leader, B. et al. (2003) Infect. Immun. 71:6054- 6057) 。因此，商业的梅毒诊断试剂的开发均使用以下一个或多个抗原： 蛋白 梅毒螺旋体的基因 Tp15 膜相关的15 kDa的脂蛋白