传染病项目SOP概要1.docx

徐州市东方人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：XZDF-3-MY-02版本/修订号：A/0主题内容乙型肝炎病毒表面抗原定量测定生效日期1页共62页一、目的：规范乙型肝炎病毒表面抗原测定的标准操作程序，确保乙型肝炎病毒表面抗原测定的结果准确有效。二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的乙型肝炎病毒表面抗原。三、临床意义乙型病毒性肝炎是一种重要的公众危害性疾病，据估计全球范围内目前大约有3 亿乙肝病毒携带者。感染乙型病毒性肝炎可引起广泛的急、慢性肝脏疾病，流行病学研究已经清楚地表明乙肝病毒与肝细胞癌的发生有联系。 HBsAg是乙肝病毒颗粒（HBV）的外壳成分，为大小不一的多肽。感染乙型肝炎病毒后，机体会产生各种不同模式的抗原、抗体血清学免疫应答反应。通过检测这些标志物，不仅可以诊断感染，而且还可以判断疾病的进程和预后。HBsAg是HBV感染后第一个标志物，是提示样本是否有潜在传染性的最好的间接指标。四、方法原理本产品采用双抗体夹心法原理进行检测。用抗-HBs抗体包被磁微粒，用辣根过氧化物酶标记的抗-HBs抗体制备酶结合物。通过免疫反应形成抗体-抗原-抗体-酶复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HBsAg含量成正比。五、标本的采集与处理5.1.采用正确医用技术收集血清/血浆样本，推荐对于使用普通管采血的样本，离心前样本应37℃孵育至少1h；对于使用促凝管采血的样本，离心前样本应37℃孵育至少0.5h，离心条件10000g/min，10min；对于使用抗凝管采血的样本，离心条件10000g/min，10min。抗凝管推荐使用肝素作为抗凝剂，避免使用枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。5.2.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。徐州市东方人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：XZDF-3-MY-02版本/修订号：A/0主题内容乙型肝炎病毒表面抗原定量测定生效日期2页共62页5.3.溶血或脂血的样本不能用于测定。5.4.样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于 -20℃以下，避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。5.5.避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。六、标本拒收标准 1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明七、仪器与材料 7.1.仪器：AutoLumo A2000化学发光检测仪 7.2.试剂：AutoLumo A2000专用乙型肝炎病毒表面抗原试剂7.2.1.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。7.2.2.试剂盒于2～8℃储存，有效期12个月。7.2.3.试剂盒应防止冷冻，避免强光照射。7.2.4.试剂盒开启使用后，2～8℃保存可使用1个月。7.2.5.试剂盒可适应1周内常温运输，运输过程中应轻拿轻放，避免重压，防止雨雪淋湿和阳光曝晒。7.2.6.试剂机载稳定性7.2.6.1.试剂包（磁微粒混悬液、酶结合物）竖直向上存放，在2 ~10°C环境下冷藏保存2小时后，才可上机使用。首次使用后，机载或在2 ~10°C 环境下稳定期为28天。7.2.6.2.校准品开瓶后保存于2~8°C，稳定期可维持1个月；若需使用更长时间，应根据需要进行分装，于-20℃冻存（可以保存2个月），但应避免反复冻融。八、检验方法徐州市东方人民医院检验科免疫室作业指导书文件编号：XZDF-3-MY-02版本/修订号：A/0主题内容乙型肝炎病毒表面抗原定量测定生效日期3页共62页 8.1.消耗品检查：8.1.1.根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。8.1.2.参考相应的仪器系统操作说明。 8.2.试剂包装载：8.2.1.试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包多次以混合新试剂包内的成份，避免产生气泡。不要倒转已经打开的试剂包。8.2.2.仪器通过扫描试剂包条码自动获取测试所需的参数。8.2.3.如果特殊情况下仪器无法识别条码，可以手工输入。8.2.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.3.测试：8.3.1.将样本容器放置在仪器配套样本架中，每次测试样本量为150μl。8.3.2.装载样本架，在仪器软件界面中输入样本信息。8.3.3.选择“运行”开始测试，系统自动进行试验操作。8.3.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.4.定标：8.4.1.仪器通过扫描条码卡自动获取测试所需的参数。8.4.2.如果特殊情况下仪器无法识别条码卡，可以手工输入。8.4.3.将校准品转移至样本容器，放置在仪器配套样本架中。8.4.4.装载样本架，在仪器软件界面中输入定标信息