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　　马鞭草抗乙肝有效部位化学成分研究论文 陈丽花,李志军,王定勇 【摘要】 目的 研究马鞭草( Verbena officinalis L.)抗乙肝有效部位的化学成分。方法 采用柱层析和薄层层析分离马鞭草有效部位中的化学成分;用IR、ESIMS、1HNMR、13CNMR等波谱技术鉴定结构。结果 分离并鉴定了6个化合物，分别为山柰酚(1)、槲皮素(2)、杨梅素(3)、熊果酸(4)、马鞭草苷(5)和杨梅苷(6)。结论 首次报道马鞭草抗乙肝有效部位的化学成分;化合物3、6为首次从该植物中分离得到。 【关键词】 马鞭草 杨梅素 抗乙肝作用 Abstract:Objective To study the chemical constituents in the antiHBV active fraction of Verbena officinalis. Methods The constituents n chromatography and thin layer chromatography,and their structures the effective fraction of Verbena officinalis: kaempferol (1),quercetin (2),myricetin (3),ursolic acid (4),verbenalin (5) and myricetrin (6). Conclusions Chemical constituents in the antiHBV active fraction of Verbena officinalis this plant for the first time. Key ical constituents; myricetin; antihepatitis B virus 马鞭草(Verbena officinalis L.)为马鞭草科(Verbenaceae)多年生草本植物，始载于《名医别录》，民间以其全草或带根全草入药。马鞭草作为传统中药，具有清热解毒、消肿利尿、活血通经等功效，广泛用于治疗伤风感冒、水肿、痢疾、黄疸等证1。现代研究表明，马鞭草能抑制乙型肝炎病毒(HBV)和HBsAg，并能抗乙肝纤维化2-3。利用酶联免疫吸附检测(ELISA)技术4.freel)均为青岛海洋化工厂生产，Sephadex LH20为美国GE公司产品，ODS为日本YMC产品。马鞭草于2008年8月采自广东省广州市，由广东药学院中药学院曾令杰博士鉴定为马鞭草(Verbena officinalis L.)。 2 提取与分离 取阴干的马鞭草10 kg，粉碎至约60目，用适量甲醇室温浸泡3次,.freelL分液漏斗,依次用石油醚、CHCl3萃取3次(每次用1 000 mL溶剂)，除掉极性小的化学成分,再用EtOAc萃取3次(每次用1 000 mL),减压浓缩乙酸乙酯萃取液后得到乙酸乙酯萃取物35 g。ELISA法检测结果表明乙酸乙酯萃取物为马鞭草抗乙肝活性有效部位4。有效部位经硅胶柱层析(200～300目)，三氯甲烷甲醇系统(体积比20∶1～0∶1) 梯度洗脱。TLC检测，合并相同组分，共得到7个部分;各部分再经Sephadex LH20柱层析洗脱剂为甲醇水(体积比3∶2)、ODS柱层析洗脱剂为乙腈水(体积比1∶1)、制备薄层层析(展开剂为氯仿甲醇体系)等反复分离纯化，得到化合物1(20 mg)、2 (38 mg)、3 (15 mg)、4 (30 mg)、5 (55 mg)和6 (10 mg)。 3 结构鉴定 化合物1：黄色粉末，mp 275.0～276.5 ℃。HClMg试验显阳性。ESIMS(m/z): 287.0 M+H+。1HNMR(500 MHz,DMSOd6) δ: 12.18 (1H,s,5OH),8.15 (2H,d,J=8.5 Hz,H2′,6′),7.02 (2H,d,J=8.5 Hz,H3′,5′),6.55 (1H,d,J=2.0 Hz,H8),6.27 (1H,J=2.0 Hz,H6)。13CNMR (125 MHz,DMSOd6 ) δ: 146.9 (C2),133.5 (C3),176.5 (C4),162.2 (C5),99.0 (C6),164.9 (C7),94.3 (C8),157.6 (C9),103.9 (C10),123.1 (C1’),130.3 (C2′,6′),116.2 (C3′,5′),160.1 (C4′)。以上波谱数据与文献5报道的山柰酚一致。 化合物2：黄色粉末，mp 303.0～304.5 ℃。HClMg试验显阳