各种Taq酶中大肠杆菌基因组DNA残留.docVIP

各种Taq酶中大肠杆菌基因组DNA残留对实验的影响 “酶：大多是蛋白质，但少数具有生物催化功能的分子并非为蛋白质，有一些被称为核酶的RNA分子也具有催化功能。此外，通过人工合成所谓人工酶也具有与酶类似的催化活性，包括人工合成的DNA。 有人认为酶应定义为具有催化功能的生物大分子，即生物催化剂TGTGTAGCGGTGAAATGCG （R）TCGTTTACGGCGTGGAC 该对引物序列扩增产物片段长度为138bp 为了搞清楚为什么，小新开始重复大师兄的试验，出来的结果依旧如此，排除实验员操作的问题，那就是体系的原因了。正准备逐一排查到底是哪个实验成分有问题时，小新发现了对照组阴性【就是没有加入DNA模板的那组】居然和其他组的结果一样，那就说明是体系里混进去了其他的DNA模板，并且是细菌的DNA模板。由于换了新的Taq酶才开始出现这种结果，那么头号怀疑对象当然就是新的Taq酶咯。 问了一下师兄，现在的Taq酶是哪家公司的，师兄说是JL的，恰好小新手上还有一些其他公司的Taq酶，那就正好来个大检查，看看到底是哪家公司的Taq酶混进去的DNA最多，还是大家生产的酶都混进去了很多DNA。 试验过程倒是很简单，通过简单的阴性试验就能出来结果。 小新选取了四种不同公司的酶：1、莱枫，2、JL，3、康为，4、TaKaRa，采用引物序列依旧是16s的通用引物。在此基础上进行了全阴性试验