聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底上sh-sy5y 细胞vegf 和il-8 的分泌 .pdf

范志刚 等/聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底上 SH-SY5Y 细胞VEGF 和IL-8 的分泌及表达 1629 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology November 25, 2013, 29(11): 1629−1643 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 组织工程与细胞培养 聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底上SH-SY5Y 细胞 VEGF 和IL-8 的分泌及表达 范志刚，林雨，黄岂平，罗美蓉，田青华，钟冬火，冯全义，吴泽志 重庆大学生物工程学院 生物流变科学与技术教育部重点实验室，重庆 400044 范志刚, 林雨, 黄岂平, 等. 聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底上SH-SY5Y 细胞VEGF 和IL-8 的分泌及表达. 生物工程 学报, 2013, 29(11): 1629−1643. Fan ZG, Lin Y, Huang QP, et al. Secretion and expression of vascular endothelial growth factor and interleukin-8 by SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Chin J Biotech, 2013, 29(11): 1629−1643. 摘 要 : 以紫外光光刻、硅蚀刻及复制模塑技术制备了聚乳酸 (PLLA) 微柱阵列型拓扑结构基底，考察了 SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞在拓扑结构基底上的生长及血管内皮生长因子 (VEGF) 和白细胞介素-8 (IL-8) 的分泌及表达。细胞的形态及铺展采用扫描电子显微图像进行分析，细胞在拓扑结构基底上生长 24 h 后的 VEGF 及IL-8 分泌量采用ELISA 进行检测，VEGF 及IL-8 在mRNA 水平的表达量以实时定量PCR 进行评价。 实验中成功制备了微柱名义直径为2 μm 和4 μm 、微柱名义间距为2 μm 和7 μm 的4 种拓扑结构基底。研究发 现，SH-SY5Y 细胞在2-2 μm (微柱名义直径-名义间距) 、4-2 μm 、4-7 μm 拓扑结构基底上的VEGF 和/或IL-8 分泌量和表达较之PLLA 平面基底上相应值出现上调，而在2-7 μm 拓扑结构基底上VEGF 及IL-8 二者均表现 出表达和分泌量大幅度和明显的上调。与在PLLA 平面基底上相比，SH-SY5Y 细胞在拓扑结构基底上表现出 细胞形态 (铺展面积及圆度) 的明显变化，细胞VEGF 及 IL-8 分泌量和表达的上调伴随细胞铺展面积的明显 VEGF 降低。结果表明微柱阵列型拓扑结构是影响SH-SY5Y 细胞VEGF 、IL-8 分泌及表达的重要微环境因素， 和IL-8 可能构成SH-SY5Y 细胞在拓扑结构基底上生长的重要分泌物标志。 关键词: 复制模塑，ELISA ，实时定量PCR ，人神经母细胞瘤细胞，分泌物标志 Received: December 17, 2012; Accepted: April 1, 2013 Supported by: Research Foundation for Doctoral Programs in Universities under the State Ministry of Education of China (No. 20100191110032), Foundation for Sci Tech Resea