第七章_固定化酶to学生剖析
第七章 固定化酶 缺点: 酶活力损失; 增加了酶的成本; 只适用于可溶性底物,尤其可溶性小分子底物,对大分子不适宜; 不适宜于多酶反应。 选择载体 应考虑: 载体的形式:薄片状、管状、纤维状、颗粒状等; 载体的结构:孔型、半透膜性和非孔型; 载体的性质:水溶性和水不溶性; 酶偶联量或装载量和实效系数。 无机(inorganic) 天然有机(organic from natural sources) 合成有机(organic synthetic materials) 酶固定化时遵循的原则: 维持酶的催化活性和专一性; 固定化应有利于自动化、连续化反应; 固定化酶应具有最小的空间位阻; 酶与载体必须牢固结合; 固定化酶应具有最大的稳定性; 固定化酶易与产物分离; 固定化酶成本要低; 充分考虑固定化酶在制备工程和应用中的安全因素。 非化学结合法 结晶法:使酶结晶从而实现固定化的方法。 分散法:将酶分散于水不溶相中而实现固定。 超滤反应体系 离子结合:酶通过离子键结合具有离子交换基的水不溶性载体的固定化方法。常用载体:DEAE-纤维素, DEAE-葡聚糖凝胶等。使用注意:pH、离子强度、温度 物理吸附 通过氢键、疏水键、电子亲和力等物理作用 选择载体的原则 (1)要有巨大的比表面积 (2) 要有活泼的表面 (3) 便于装柱进行连续反应。 缺点:结合力较弱,酶与载体结合不牢固而容易脱落
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