实验四 体积排除色谱（sec）法测定聚合物的 分子量及分子量分布 .docVIP

实验四 体积排除色谱（SEC）法测定聚合物的 分子量及分子量分布 分子量的多分散性是高聚物的基本特征之一。聚合物的性能与其分子量和分子量分布密切相关。体积排除色谱（size exclusion chromatography，SEC）是液相色谱的一个分支，已成为测定聚合物分子量分布和结构的最有效手段。其还可测定聚合物的支化度，共聚物及共混物的组成。采用制备型的色谱仪，可将聚合物按分子量的大小分级，制备窄分布试样，供进一步分析和测定其结构。该方法的优点是：快捷、简便、重视性好、进样量少、自动化程度高。 体积排除色谱在一段时期内常称为凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography，GPC）、凝胶过滤色谱（gel filtration chromatography，GFC）、凝胶色谱。从分离机理看，使用体积排除色谱较为确切。 一、实验目的： 1．了解SEC法测定高聚物分子量及分子量分布的原理； 2．掌握Waters—510型仪器的操作技术； 3．掌握SEC数据处理方法。 二、基本原理： 体积排除色谱（SEC）分离机理认为在多孔载体（其孔径大小有一定的分布，并与待分离的聚合物分子尺寸可比拟的凝胶或多孔微球）充填的色谱柱里引入聚合物溶液，用溶剂淋洗，体系是处于扩散平衡的状态。聚合物分子在柱内流动过程中，不同大小的分子向载体孔洞渗透的程度不同，大分子能渗透进去的孔洞数目比小分子少，有些孔洞即使大小分子都能渗透进去，但大分子能渗透的深度浅。溶质分子的体积越小渗透进去的几率越大，随着溶剂流动，它在柱中保留的时间越长。如果分子的尺寸超过载体孔的尺寸时，则完全不能渗透进孔里，只能随着溶剂从载体的粒间空隙中流过，最先淋出。当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较小的分子在柱中保留的时间比大分子保留的时间要长，于是整个样品即按分子尺寸由大到小的顺序依次流出。 色谱柱总体积为Vt，载体骨架体积为Vg，载体中孔洞总体积为Vi，载体粒间体积为V0，则 Vt＝Vg＋V0＋Vi V0和Vi之和构成柱内的空间。溶剂分子体积远小于孔的尺寸，在柱内的整个空间（V0＋Vi）活动；高分子的体积若比孔的尺寸大，载体中任何孔均不能进入，只能在载体粒间流过，其淋出体积是V0；高分子的体积若足够小，如同溶剂分子尺寸，所有的载体孔均可以进出，其淋出体积为（V0＋Vi）；高分子的体积是中等大小的尺寸，它只能在载体孔Vi的一部分孔中进出，其淋出体积Ve为 Ve＝V0＋KVi K为分配系数，其数值0≤K≤l，与聚合物分子尺寸大小和在填料孔内、外的浓度比有关。当聚合物分子完全排除时，K＝0；在完全渗透时，K＝1（见图4-1）。当K＝0时，Ve＝V0；，此处所对应的聚合物分子量是该色谱柱的渗透极限（PL），商品SEC仪器的PL常用聚苯乙烯的分子量表示。聚合物分子量超过PL值时，只能在V0以前被淋洗出来，没有分离效果。 V0和Vg对分离作用没有贡献，应设法减小；Vi是分离的基础，其值越大柱子分离效果越好。制备孔容大，能承受压力，粒度小，又分布均匀，外形规则（球形）的多孔载体，让其尽可能紧密装填以提高分离能力。柱效的高低，常采用理论塔板数N和分离度R来作定性的描述。测定N的方法可以用小分子物质作出色谱图，从图上求得流出体积Ve和峰宽W，以下式计算N值：N＝（4Ve／W）2，N值越大，意味着柱子的效率越高。“l”、“2”代表分子量不同的两种标准样品，Ve,1、Ve,2、W1，W2为其淋出体积和峰宽，分离度R的计算为，若R≥1，则完全分离。 上面阐述的SEC分离机理只有在流速很低，溶剂粘度很小，没有吸附，扩散处于平衡的特殊条件下成立，否则会得出不合理的结果。 实验测定聚合物SEC谱图，所得各个级份的分子量测定，有直接法和间接法。直接法是指SEC仪和粘度计或光散射仪联用；而最常用的间接法则用一系列分子量已知的单分散的（分子量比较均一）标准样品，求得其各自的淋出体积Ve，作出logM对Ve校正曲线（图4-1）。 logM＝A－BVe -----------------------------------------（1） 当logM＞logMa时，曲线与纵轴平行，表明此时的流出体积（V0）和样品的分子是无关，V0即为柱中填料的粒间体积，Ma就是这种填料的渗透极限。当logM＜logMa时，Ve对M的依赖变得非常迟钝，没有实用价值。在logMa和logMd点之间为一直线，即式（1）表达的校正曲线。式中A、B为常数，与仪器参数、填料和实验温度、流速、溶剂等操作条件有关，B是曲线斜率，是柱子性能的重要参数，B数值越小，柱子的分辨率越高。 上述订定的校准曲线只能用于与标准物质