课件脑源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞.pdfVIP

854 第一军医大学学报 J First Mil Med Univ 2004g24(8) 脑源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞 ! ! ! ! ! ! ! ! ! 黄 文 张 成 陈松林 张为西 姚晓黎 曾 缨 黄 慧 冯善伟 柳太云 中山大学医学院附属第一医院神经内科 广东广州510080 # 摘要 目的 探讨脑源性神经营养因子 体外诱导骨髓间充质干细胞 分化成神经元样细胞的作用及其对诱 ! BDNF MSCs 导后的神经元样细胞保护作用 为治疗神经系统疾病提供更优良的细胞 方法 体外培养 至第 代后 分别用 MSCs 5 巯基乙醇 诱导 诱导后的第 和 小时计算两组神经元样细胞数 对各时间点两组神经元样 BDNF !- !-ME MSCs 1 3 6 细胞阳性率进行了比较 诱导后行神经细胞标记抗体的免疫细胞化学 RT-PCR 及蛋白质印迹鉴定 结果 两组诱导剂 诱导后的细胞均呈神经元样细胞的形态 组诱导分化后细胞的存活时间远较 组长 组在诱导后 BDNF !-ME g BDNF 6 h 近于诱导高峰 而 在诱导 即达高峰 但随后神经元样细胞渐死亡 免疫细胞化学结果显示在两组诱导后细胞 !-ME 2 h 的巢蛋白(Nestin) 神经细胞特异性烯醇化酶(N SE) 微管相关蛋白-2(MAP-2) 神经丝蛋白(NF)表达均呈阳性 而胶质纤 维酸性蛋白 GFAP 表达呈阴性 RT-PCR 显示N SE NFL MAP-2 的mRNA 表达阳性 GFAP 有较弱的表达 蛋白质印 迹可见两组诱导剂诱导的细胞均