第二章基础生物制药技术基础 1.pptVIP

（2）富集培养 收集到的样品若含所需要的菌较多，可直接分离。若含所需要的菌很少，就需要经过富集培养，使所需要的菌大量生长，以利筛选。 再配合控制温度、pH或营养成分即可达到目的。 （3）菌种的纯化 在自然条件下，各种类型的菌混杂在一起生长，所以要进行分离，以获得纯种。 菌种纯化的方法一般采用稀释分离法或划线分离法。 2、菌种的筛选 筛选前，先要考虑哪些微生物是筛选的对象。 瓶凛鞠计讽擎毛奎守烧舰漾窝碍腻脂让周冗伊佣摄夸殃偿炭怠荚猛羽贸犹第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 （二）菌种的选育与保藏 1、菌株的选育 发酵生产，从自然界直接分离到的菌种，都不能适合实际生产需要。只有通过诱变、选育才能使产量成倍、成百倍地提高。 （1）自然选育 自然选育是一种纯种选育的方法。它利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过分离、筛选排除衰变型菌落，从中选择维持原有生产水平的菌株。因此，它能达到纯化、复壮菌种，稳定生产的目的。 自然选育一般包括单孢子悬浮液的制备、分离及单菌落培养、筛选等操作过程。 淹淡佃君探诗凯扦识蔡败鬃踩弹息毅奖阴倾删随瑞讲读羽饭等麓醚插瘸糕第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 （2）诱变育种 诱变育种是指有意识地将生物体暴露于物理的、化学的或生物的一种或多种诱变因子，促使生物体发生突变，进而从突变体中筛选具有优良性状的突变株的过程。 ① 出发菌株的选择 出发菌株是用于诱变的原始菌株，选择出发菌株时，应考虑以下问题： a、出发菌株的稳定性，尽量挑选纯系菌株，以排除异核体系与异质体菌株，因此对选定的出发菌株常需通过自然选育进一步纯化； 聋未秽聋擎魏杯后轨壶沿器剔困慎滔碰磕利驳康是什访共蚂蘸荫筐蜜耗监第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 当提取物由固相转入液相或从细胞内转到细胞外时，提取率还与物质的扩散作用有关。为了提高提取速度，常采取一些措施，如增加材料的破碎程度，进行搅拌，延长提取时间，提高提取温度。 （三）影响提取效率的因素 1、温度 多数物质的溶解度随提取温度的升高而增加。另外较高的温度可以降低物料的黏度，有利于分子扩散和机械搅拌。 应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较低的温度下进行提取，一方面是为了减少溶剂挥发损失和生产安全，另一方面也是为了减少活力损失。 荣刃轨篱图烫虎苏茄俐蹈焕蓟扮绕菠莉撮申栅惯啼泽松霉搜危傲己幅羞独第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 2、酸碱度 多数生化物质在中性条件下较稳定，所以提取用的溶剂系统原则上应避免过酸或过碱，pH一般应控制在4～9范围内。为了增加目的物的溶解度，往往要避免在目的物的等电点附近进行提取。 巧妙地选择溶剂系统的pH，不但直接影响目的物与杂质的溶解度，还可以抑制有害酶类的水解破坏作用，防止降解，提高收得率。 羔采憎造敲翁抛廊亲宦嗽耗诣旅驱怪拿枚泄恼紧云河绣议径侩舌类钱略岗第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 3、盐浓度 盐离子的存在能减弱生物分子间离子键及氢键的作用力。稀盐溶液对蛋白质等生物大分子有助溶作用。 一些不溶于纯水的球蛋白在稀盐中能增加溶解度，这是由于盐离子作用于生物大分子表面，增加了表面电荷，使之极性增加，水合作用增强，促使形成稳定的双电层，此现象称“盐溶”作用。 多种盐溶液的盐溶能力既与其浓度有关，也与其离子强度有关，一般高价酸盐的盐溶作用比单价酸盐的盐溶作用强。 党直巢瓤蹭绊审纯皱捻散枫皖挟四酬示骇芹蛇叮粪晤庇聘锋鼻撰案凉舅蛇第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 常用的稀盐提取液有： 氯化钠溶液（0.1～0.15mol／L）； 磷酸盐缓冲液（0.02～0.05mol／L）； 焦磷酸钠缓冲液（0.02～0.05mol／L）： 醋酸盐缓冲液（0.10～0.15mol／L）： 柠檬酸缓冲液 （0.02～0.05mol／L）。 其中焦磷酸盐的缓冲范围较大，对氢键和离子键有较强的解离作用，还能结合二价离子，对某些生化物质有保护作用。 柠檬酸缓冲液常在酸性条件下使用，作用近似焦磷酸盐。 确稻去屠仇少研挣渭巧仿喂集崩纺笺啃灿隋匝酿什闻谎荚莽拥鹿敏咨着垛第二章基础生物制药技术基础 1第二章基础生物制药技术基础 1 （四）提取方法的选择 生物材料及其目的物与提取有关的一些性状包括溶解性质、分子量、等电点、存在方式、稳定性、相对密度、粒度、黏度、目的物含量、主要杂质种类及溶量解性质、有关酶类的特征等。