GRP78、CHOP、TRB3在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用研究.pdfVIP

贵阳医学院2014 届硕士学位论文 血再灌注损伤发生发展。 关键词大鼠；脑缺血再灌注；内质网应激；GRP78；CHOP；TRB3；细胞凋亡 - 3 - 贵阳医学院2014 届硕士学位论文 前 言 随着生活水平提高、生活方式改变及人口老龄化加剧，脑血管疾病发 病率明显上升，其高致残率及高病死率的特点给人们的健康带来了极大的 危害，也加重了人们的经济负担，其中缺血性脑血管病占 60～80%[ 1] 。脑缺 血后部分血管能自然再通或经溶栓治疗后恢复再通，但随之而来的是出现 再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤 （cerebral ischemia-reperfusion injury ，CIRI ） 是指因脑缺血致脑组织坏死前，闭塞的脑血管再通后缺血性损伤却进一步 [2] 加重的现象 ，最终导致神经细胞坏死或凋亡，脑缺血再灌后细胞凋亡可能 是脑细胞的一种迟发性死亡。近年来研究发现，内质网应激 （endoplasmic reticulum stress, ERS ）介导的凋亡途径是除死亡受体介导的信号转导途径和 [3] 线粒体途径之外的一种新的诱发凋亡途径 ，内质网应激是脑缺血再灌注损 [4] [5] 伤中的一个重要环节 ，是诱导脑细胞凋亡的重要机制之一 。但其在脑 缺血再灌注损伤发生发展过程中如何引起脑细胞凋亡，目前机制尚不完全 清楚。 内质网 （endoplasmic reticulum, ER ）是蛋白质的合成、翻译后修饰、折叠 组装以及脂质合成、细胞内钙离子储存的场所，在细胞的生长、存活以及分化中 起到至关重要的作用，当组织细胞受到缺血缺氧、炎症及氧化应激等病理条件的 刺激时，可导致细胞内内质网应激，内质网应激是细胞的一种适应性保护机制， [6] 适当的内质网应激可维持细胞内环境稳定 。但长时间过强的内质网应激会使 未折叠蛋白持续增加，引起细胞功能失调，内质网应激由促细胞生存的保护 [7] 效应向促细胞凋亡效应转化，导致内质网应激相关性凋亡 。内质网应激相 关性凋亡途径近年受到广泛关注，而在内质网应激引起的凋亡过程中涉及到 的凋亡相关蛋白更是研究的热点。GRP78 是内质网首个被发现的分子伴侣， 正常情况下，GRP78 与信号感受蛋白、Caspase- 12 等以复合体形式存在神 经元细胞中，起抗凋亡作用[8- 10] 。当脑缺血再灌注后内质网应激超过一定程 度与时间，复合体发生解离，游离的Caspase- 12 直接激活 Caspase-9 ，后者 [ 11] 活化Caspase-3 等死亡效应蛋白酶，导致细胞凋亡 。内质网应激相关分子 CHOP 是内质网应激蛋白GRP78 下游的信号分子，正常情况下，胞内CHOP - 4 - 贵阳医学院2014 届硕士学位论文 ［ ］ G 表达十分低。当内质网应激时，其表达明显增加 。资料显示，内质网应激诱 导剂thapsigargin 和tunicamycin 均可使CHOP 表达上调，促进凋亡；对原代培养 的大鼠心肌微血管内皮细胞，进行缺氧/复氧损伤，CHOP 表达升高，细胞凋亡 [12] 增加；而缺氧预适应则通过下调CHOP 表达，减少缺氧/复氧引起的细胞凋亡 。 ［ ］ 13 郑胜哲