勋章菊花粉鞘色素及蛋白分析-江苏农业科学.PDF

— ３３２— 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第９期 谢兰曼，祝　燕，沈雪林，等．勋章菊花粉鞘色素及蛋白分析［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（９）：３３２－３３４． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０９．０９６ 勋章菊花粉鞘色素及蛋白分析 １ ２ ３ １ 谢兰曼 ，祝　燕 ，沈雪林 ，胡建新 （１．江苏联合职业技术学院苏州旅游与财经分院风景园林系，江苏苏州２１５１０４； ２．苏州园林发展股份有限公司，江苏苏州２１５０００；３．江苏省苏州市种子管理站，江苏苏州２１５０００） 　　摘要：为研究勋章菊授粉形式对种子形成的影响，对其花粉鞘及蛋白成分进行分析。结果表明，黄色花粉外层含 有类胡萝 卜素，经板层分析得到与标准样品 －胡萝 卜素具有相同的比移值（Ｒ值）；经花粉表面蛋白色谱 －质谱分 β ｆ 析发现，大多为３０～５０ｋｕ；通过搜索、比对蛋白质发现，其中较可信的蛋白有３种，它们的肽段属于驱动蛋白马达结构 域，在各自有丝分裂过程中参与染色体的运动和主轴伸长。该结果可为研究菊科植物自交及异交的亲和机制提供理 论依据。 　　关键词：勋章菊；花粉鞘；蛋白质；花粉；色素 ＋ 　　中图分类号：Ｓ６８２．１１０．１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０９－０３３２－０２ 　　勋章菊为菊科勋章菊属植物，花形奇特，花色多彩，花心 ６５∶３５的展开剂中展开 １５ｍｉｎ，取出硅胶板置室内晾干，在 ［４］ 具深色眼斑，形似勋章，具浓厚的野趣，是园林中常见的盆栽 ＷＤ－９４０３型紫外仪下进行观察 。 和花坛、及地被花卉植物，对勋章菊开展相关研究，为其在园 １．２．２　花粉表面蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ　取０．５ｍＬ离心管加入 林中应用开辟更广阔的前景。 ６０ Ｌ提取缓冲液，取红纹头状花序，小心摘取 ８～１０朵刚刚 μ 植物开花后，须要经过花粉萌发、花粉管进入胚囊和配子 开放、柱头呈蜡烛状的管状花，放入离心管中，浸提２ｈ；取 ［１］ 融合等一系列过程才能完成受精作用 。其中，最为关键性 ８～１０朵柱头呈牛角状的管状花，观察是否附着花粉，选择无 的一步就是花粉在柱头上的识别，对完成受精起着决定性作 花粉附着的柱头置离心管中浸提２ｈ，摇匀后沸水浴 １０ｍｉｎ， 用。马纪峰等研究表明，柱头通过分泌某些物质主动地参与 静置，取上清液进行 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳。电泳选择浓缩胶 ［２］ ［６］ 花粉与柱头的识别过程 ，而花粉粒的初始识别是由花粉鞘 ５％、分离胶８％、１．５ｍｍ厚胶板 。 调节的，花粉鞘是由花药绒毡层分泌并沉积于花粉表面的中 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ采用ＤＹＹ－１０型电泳仪，１．５ｍｍ胶板，提 性脂类、碳水化合物、蛋白质和类胡萝 卜素等组成的半固态覆 前配制８％分离胶及５％浓缩胶，制好后取蛋白上清液上样 ［３－４］ 盖层 。花粉粒和雌蕊柱头组织间产生的蛋白质则是识别 ４０ Ｌ，室温电泳至溴酚蓝指示带距凝胶底边３～５ｍｍ时停 μ