从而阻碍了lac操纵子的转录.ppt

当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用 The Lac Operon:When Lactose Is Present But Not Glucose The Lac Operon:When Glucose Is Present But Not Lactose The Lac Operon:When Neither Lactose Nor Glucose Is Present 四 二组分调控系统和信号转导 传感蛋白（sensor protein) 应答调节蛋白（response regulator protein) 2. mRNA稳定性对翻译水平的影响 降解mRNA的酶都是3‘-5’外切核酸酶，但mRNA的二级结构可以阻遏这些酶的作用 IR（反向重复顺序）的存在可以防止3-5外切核酸酶的降解作用 在malE3‘端有IR存在，可以形成茎环保护其不被外切核酸酶所降解 因此，malE产物比malG，F产物含量高。 3. 调节蛋白的调控作用 也为：蛋白质合成的自体调控 （autogenous regulation) DNA序列重排 沙门菌鞭毛素基因的调节 例子： 大肠杆菌外膜蛋白有两种，一种为ompC，一种为 ompF，OmpC和OmpF两个基因编码了OmpC和OmpF两种外膜蛋白，这两个基因并不连锁，但却受到培养基的渗透压的控制。它们的表达和渗透压改变有关。 在高渗透压时， ompC合成增多，ompF的合成受到抑制。 在低渗透压时，ompF合成增多， ompC的合成受到抑制。 它们如何对渗透压的改变作出反应呢？ EnvZ基因编码一种作为渗透压感受器的一种受体蛋白。当渗透压增加时，EnvZ激活OmpR的产物（一种正调节蛋白）。它可以激活OmpC和调节蛋白mic F两个基因转录。 micF 的产物是一条长174nt的RNA，称为micRNA（mRNA-interfering-complementary mRNA ）,即干扰mRNA的互补RNA。一般都称之为反义RNA( antisense RNA )。 MicF RNA可以和OmpF mRNA上包含核糖体结合位点的翻译起始区互补结合，形成双链区。 MicF RNA 通过和OmpF mRNA的结合来作为一种调节物并阻止其翻译。 当渗透压增加时会导致micRNA的合成，而关闭了OmpF mRNA的翻译。 micF RNA能够与ompF mRNA的前导序列中的44个核苷酸（包括SD序列）以及编码区域（包括起始密码子AUG）形成杂合双链，从而抑制ompF mRNA的翻译。 反义RNA的概念可以用于研究基因的功能 反义RNA的合成能抑制原核基因或真核基因的靶RNA。人工合成的编码反义RNA的基因已被引入大肠杆菌中，它们可通过与mRNA互补阻止特异靶基因的表达。 5. 稀有密码子对翻译的调控 细胞内对应于稀有密码子的tRNA较少，高频率使用这些密码子的基因翻译过程容易受阻，影响了蛋白质的总量。 稀有的密码子，细胞中其相应的tRNA含量很少，不易获得，这样就延长了核糖体在mRNA上行经的时间，从而降低了翻译的速度。 这三个基因连锁在同一操纵子上，它们产物的量何以能差异如此之大？ 结构蛋白 编码Ile的AUA（稀有密码子）在dnaG基因中它占有的频率是32%，几乎占了1/3，但细胞中其相应的tRNA含量很少，不易获得，这样就延长了核糖体在mRNA上行经的时间，从而降低了翻译的速度。 rpoD基因正好与此相反，AUA的分布频率为0，根本就不使用这个稀有密码子，所以合成σ亚基不受其影响。而使用最多的密码子AUC，其tRNA也是细胞中含量最丰富的，正好可以满足其需要，因此其产量可以高达2800个拷贝。 6. 重叠基因对翻译的影响 正常情况下，色氨酸操纵子5个基因产物是等量的，但trpE突变后，其邻近的trp D的产量比下游的trpBA产量要低得多。为什么？ 研究trpE和trpD以及trpB和trpA两对基因中核苷酸序列与翻译偶联的关系，发现trpE基因的终止密码子和trpD基因的起始密码子共用一个核苷酸 ara操纵子的调控有两个特点： 第一，araC表达受到AraC的自身调控。 第二，AraC既是ara操纵子的正调节蛋白（需cAMP-CRP的共同参与，起始转录），又是其负调节蛋白。这种双重功能是通过AraC蛋白的两种异构体来实现的（Pi和Pr)。 体系中葡萄糖水平较高，阿拉伯糖水平较低时： 体系中有阿拉伯糖但无葡萄糖存在时： 三 阻遏蛋白LexA的降解与细菌中的SOS应答 阻遏蛋白LexA的降解与细菌中的SOS应答 SOS诱导型DNA修复系统：