甲烷氧化菌培养基特异性分析-应用与环境生物学报.PDF

2016-12-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2016.01023 / Chin J Appl Environ Biol 2016 22 ( 6 ) : 1127-1133 应用与环境生物学报 ， * 甲烷氧化菌培养基特异性分析 1, 2 1 3 杨 帆 沈忠民 梅泽 1成都理工大学，油气藏地质及开发工程国家重点实验室 成都 610059 2 中国石化石油勘探开发研究院无锡石油地质研究所 无锡 214151 3江南大学环境与土木工程学院 无锡 214112 摘 要 选取4种不同配方的甲烷氧化菌培养基，同时采集中石化江苏油田富安区块油气区和背景区地表土壤样品，利 用平板计数法、基因定量和T-RFLP多态性片段分析技术分析和评估其培养效果. 实验结果表明，在不同配方培养基 pmoA 4 培养条件下，油气区土壤样品中甲烷氧化菌数量及扩培后的甲烷氧化菌 基因丰度均高于背景区样品， 种培养基 1 均能区分油气区和背景区甲烷氧化菌数量差异. 异常分离指数表明 号培养基在实验检测中对微生物数量异常分离度 T-RFLP 4 1 更高. 多态性片段分析表明， 种培养基培养条件下的甲烷氧化菌多样性程度均较高， 号培养基对应的优势油 1 气指示微生物甲基球菌和甲基暖菌相对丰度略高，从甲烷氧化菌群落多样性角度进一步证明了 号甲烷氧化菌培养基 1 8 的特异性较强. 本研究确认了 号培养基在实验检测中的可靠性和准确性，为油气微生物勘探提供了技术支撑. （图 表3 参28） pmoA 关键词 培养基；平板计数法；甲烷氧化菌； 基因；多样性分析 CLC Q939.99 : P618.130.8 Analysis on the specificity of methane-oxidizing bacteria media* 1, 2 1 3 YANG Fan , SHEN Zhongming & MEI Ze 1State Key Lab of Oil-gas Reservoirs Geology and Exploitation, Chengdu University of Technology, Chengdu 610059, Chin