功能性pva／pa6复合纳米纤维的制备及固定化酶研究.pdf

第24卷 第4期 河南工程学院学报 (自然科学版) Vo1．24．No．4 2012年 12月 JOURNALOFHENAN INSTITUTEOFENGINEERING Dec．2012 功能性 PVA／PA6复合纳米纤维的制备及固定化酶研究 凤 权，马坤强，李 双 (纺织面料安徽省高校重点实验室安徽工程大学，安徽 芜湖 241000) 摘 要：利用静 电纺丝制得PVA／PA6复合纳米纤维，再通过环氧化反应制备功能性PVA／PA6复合纳米纤维并以之为载 体固定过氧化氢酶．实验结果表明，PVA／PA6复合纳米纤维在合理的反应时间内形态稳定；固定后的过氧化氢酶体现 出更好 的存贮稳定性；经过对酶催化反应进行动力学分析，分别得到自由酶和固定化酶的 …值和 值，动力学参数体现了载体与 固定化酶之间 良好 的生物亲和性． 关键词：功能性；PVA／PA6；复合纳米纤维；酶固定 中图分类号：TS941 文献标志码：A 文章编号：1674—330X(2012)04—0010—05 近年来，纳米科学的迅速发展为酶的稳定性使用和高效催化带来了新的机遇．应用静电纺丝技术制备的 纳米纤维由于其具有比表面积大、空隙率高等诸多优点开始在酶固定化领域得到关注．纳米纤维和酶技术结 合可制备纳米酶催化剂，其纳米结构不仅能使酶长期保持活性稳定，而且能有效提高酶在水相、有机相、油／ 水界面的催化效率，并使多酶体系催化反应和辅酶再生成为可能 ¨．作为在食品、纺织、造纸、医疗和环保等 领域有着广泛应用的过氧化氢酶，其固定化研究具有重要理论意义和应用价值 ． 本研究以制得的PVA／PA6复合纳米纤维为基体，利用其表面的羟基与环氧氯丙烷反应，在复合纳米纤 维表面引入一定量的环氧基团，通过环氧基团与过氧化氢酶的氨基反应固定化过氧化氢酶，并研究固定化酶 的存贮稳定性，分析其生物催化的动力学过程． 1 实验材料与设备 1．1 实验材料 过氧化氢酶 (EC．1．11．1．6)购置于Sigma公司；88％ 磷酸、丙酮、氯化铜、氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢 二钾、95％乙醇、考马斯亮蓝 (G一250)、30％过氧化氢， 购于国药化学试剂有限公司；环氧氯丙烷，购于上海凌峰 化学试剂有限公司；二 甲基亚砜 (DMSO)，购于无锡市亚 盛化工有限公司．实验中所有药品皆为分析纯，使用前未 经进一步纯化． 1．2 实验设备 UV一6100S型紫外可见分光光度计(Mapada，上海)； S一4800场发射扫描电子显微镜 (Hitachi，日本)；静电纺 图1 自制静电纺丝装置 丝装置 自制，主要包括进样系统、高压直流电源、接收装 Fig．1 Apparatusofself-madeelectro-spinning 置和相应的控制系统，如图1所示． 收稿 日期 ：2012—09—25 基金项 目：安徽省 自然科学基金项 目(KJ2012A039) 作者简介：风权(1975一)，男，安徽舒城人，副教授，博士，主要从事功能性纳米纤维研究 第4期 凤 权，等：功能性PVA／PA6复合纳米纤维的制备及固定化酶研究 ·11 · 2 实验方法 2．1 静电纺制备PVA／PA6复合纳米纤维 用PVA／PA6质量百分比为4％／12％的纺丝液，按文献[8]提供的方法制备PVA／PA6复合纳米纤维． 2．2 PVA／PA6复合纳米纤维的环氧化反应 称取PVA／PA6复合纳米纤维膜，每份约0．05g，精确称量后分别放人 15mL的二甲基亚砜溶剂中，加 入5mL的环氧氯丙烷，NaOH为催化剂，调pH值为 10，在摇床中振荡反应一段时间，转速为 120r／min，反应 温度为60℃，然后用2mol／／L的HC1滴定至中性，再用丙酮与蒸馏水洗净，40c=【真空干燥后备用． 准确称取一定量环氧反应后的PVA／PA6复合纳米纤维，加入过量的NaS0溶液，室温下于量瓶中反 应 lh．以酚酞为指示剂，用0．2