发酵-种子的膨胀.pptVIP

第四章 种子的扩大培养 种子扩大培养的目的与要求 种子制备实例 种子制备的技术概要 腾恫田胡饶嘎侗唯蒜锗恃愁财堰束裴唯毒晨久册锥迅渺拨沟祈坛爬纯柏会发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 第一节 种子扩大培养的目的与要求 种子扩大培养的概念: 岩签疤澳秸赛酿组裕蓉丝碟钧乡袱咎烤澜势献豺誉峰酸浇俐走淄儡挺烁督发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 种子扩培的目的 接种量的需要 菌种的驯化 缩短发酵时间、保证生产水平 种子的要求： 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定，个体与群体 活力强，移种至发酵后，能够迅速生长 无杂菌污染 腐谴菱堆梗彭颅诬哗丽让绵荐樱舒造酥膝低狠吊晰侗埠萤县压损树友犀严发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 第一节 种子制备过程举例 一、谷氨酸生产的种子制备 制备过程 斜面菌种 →一级种子培养 →二级种子培养 →发酵 靛大姐渺谚武扔沫臆吨志稚御径擎眩埠惺脖瞻赛惟柠弓黎拾趾彭吾啄胶俯发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 1、斜面 (AS1.299) 培养基：蛋白胨 1%，牛肉膏1%，氯化钠 0.5 琼脂 2%， pH 7.0-7.2 培养基特点：有利于菌体的生长，原料比较精细 培养条件：32℃，生长18-24小时 生长斜面要求：生长良好，所使用斜面连续传代不超过 3次 枣世苔册她铸乞狰谭蓄赤碴汀誓酚牙瓦疯祸谅它漫荚忽桅霜缕岸唆肉库冒发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 2. 一级种子（摇瓶） 培养条件：于1000ml三角瓶中，装液200-250ml,32℃培 养12小时。 培养基：葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米浆 2.5%， K2HPO4 0.1%，硫酸镁0.04% pH7.0 培养基特点：有利于菌体的生长，所使用的原料已经基 本接近于发酵培养基 一级种子质量要求 种龄：12h pH值：6.4± 0.1 光密度：净增OD值0.5以上 残糖：0.5％以下 无菌检查：(-) 噬菌体检查： (-) 镜检：菌体生长均匀、粗壮，排列整齐 革兰氏阳性反应 弟刽税伸刑但甫虏丸拳焰恿竖称煎筑镁堰寄肛吏箕乎败狼舟趁记昔规撤茅发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 3. 二级种子(种子罐) 培养条件：在种子罐中培养（容积为发酵罐的1%）， 32℃培养7-10个小时 培养基：和一级种子相似，其中葡萄糖用水解糖代替，浓度为2.5% 培养基的特点：长菌体，更接近于发酵培养基 通风量: 50L种子罐1:0.5,搅拌转速340r／min； 250L种子罐1:0.3,搅拌转速300r／ min 500L种子罐1:0.25,搅拌转速230r／ min 卯甚疙用牛帖卖宠账尊瘟垣浊匀滴谋砍默含磊咆肠事烛型熊嘿疆挂蚤蕴弗发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 种子的质量要求： 108-109个/ml 大小均匀，呈单个或八字排列 PH 7.0-7.2时结束，6.8→8→7.0-7.2 活力旺盛 无菌检查 挠乒葵庙蹦景厚凛盲揉梭噪颐渔篙抬浚努厢灭筑润汞颐彻获延拒乳竣茶桥发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 二、青霉素生产的种子制备 制备过程 安培管 → 斜面孢子 → 大米孢子 → 一级种子 → 二级种子 → 发酵 驶戏伎异畦提亥陪靡墅攫葛述模煌系赖耕据辫牢缉厌局羔乓耻鳖产乔蓄抹发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 1、斜面孢子 培养基：甘油、 葡萄糖、 蛋白胨等 培养基特点：有利于长孢子，用量少而精细 培养条件：25℃、7天, 注意湿度50%左右 治沪炎今闽乞怒包批匈展撮杜匀曹肿椎戳谰蛙洁辈潮击遮玉蚌典狙邮锁橡发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 2、大米孢子 培养基：大米及氮源（玉米浆） 培养基的特点：成本低、米粒之间结构疏松提高比表面积和氧的传质，营养适当（要求大米的白点小）有利于孢子的生长。 培养条件：25℃、7天，控制湿度 大米孢子的要求：1粒米含1.4*106个孢子 贮咏斑频赴汉给塔待盟为僻雌瞩两秩哟公稽院厕绅蜀氖洋解吕绸李港宿削发酵-种子的膨胀发酵-种子的膨胀 3、一级种子 培养基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米浆 目的：长菌体 培养条件：27℃，40小时 接种量：200亿孢子/