1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 基因工程基本操作的四个步骤 1.2 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 1、目的基因:主要指的是编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子。 2、获取目的基因的方法: (1)从基因文库中获取目的基因; (2)利用PCR技术扩增目的基因; (3)通过DNA合成仪用化学方法直接合成 原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 能转录出相应的mRNA,编码蛋白质 编码区: 非编码区 原核细胞的 基因结构 ②有调控遗传信息表达的序列,其中比较重要的是两端的启动子和终止子。 启动子 ①不能转录出mRNA,不编码蛋白质。 真核细胞的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 内含子 外显子 启动子 终止子 编码区上游 编码区下游 真核细胞的 基因结构 编码区 非编码区 外显子:能编码蛋白质的序列 内含子:不能编码蛋白质的序列 与RNA聚合酶结合位点 ①不能转录出mRNA,不编码蛋白质。 ②有调控遗传信息表达的序列,其中比较重要的是两端的启动子和终止子。 非编码序列: 是指非编码区 非编码序列: 包括非编码区和内含子 原核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是_____ 的
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