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第33卷第1期 石 化 技 术 与 应 用 V01．33No．1 2015年1月 P．etrochemical Technology＆Application Jan．2015 分析测试(70～74) 采用紫外分光光度法评价石油烃降解菌的降解能力 蒋瑞萍1，孙丽丽1，解开治1一，卢钰升1，李夏1，顾文杰1，李文英1，徐培智h (1．广东省农业科学院农业资源与环境研究所，农业部南方植物营养与肥料重点实验室， 广东省养分资源循环利用与耕地保育重点实验室，广东广州510640； 2．美国加州大学伯克利分校植物与微生物学系，美国旧金山伯克利94720) 摘要：为克服摇瓶培养过程中石油烃降解菌代谢产物对紫外分光光度法比色的干扰，建立了离心前 处理一超声波萃取一紫外分光光度法，验证并评价了石油烃降解菌AcinetobacterspRP一1的降解能力。 结果表明，在254nm最佳吸收波长下，以沸程为30～60℃的石油醚为萃取剂，在石油烃质量浓度为5～ 300 ing／L范围内，吸光度与石油烃浓度间符合比尔定律关系，工作曲线的相关系数为0．9998；采用离心 前处理和超声波萃取处理样品，石油烃的平均回收率为98．9％，相对标准偏差为1．78％，最低检出限为 0．713 nlg／L；可检测出无机盐培养基中低至0．001％的残余烃。 关键词：紫外分光光度法；石油烃降解菌；萃取；比色测定 中图分类号：X832 文献标志码：B 文章编号：1009—0045(2015)01—0070—05 石油是当今社会最主要的能源之一，被誉为 准确地评价其降解能力，筛选出高效降解菌。本 “工业的血液”。一些不当排污和溢油事故会使 工作通过比较回收率，针对石油烃降解菌株筛选 石油烃类的污染问题日趋严重，危及生态系统安 过程中摇瓶培养石油烃含量的测定，优化建立了 全和人类健康¨‘21。近年来，微生物修复技术因 前处理离心一超声波萃取一紫外分光光度分析 具有高效、安全、无二次污染等优点而成为治理 法，并分别以不同时间段摇瓶培养的样品进行了 石油烃污染的一项有效技术手段¨1，被人们广泛 验证，以期为大量筛选石油烃降解菌提供一种简 关注‘4。。。微生物修复技术的核心技术是获取 便、可靠且经济的测定方法。 降解石油烃的高效菌株。快捷、准确地测定在摇 1实验部分 瓶培养过程中石油烃的降解率，是针对大样本高 1．1原材料 效筛选菌株的关键。一般采用红外光谱法、重量 RP一 石油烃降解菌，命名为Acinetobacter 法、紫外分光光度法、荧光法和气相色谱法∽“叫 sp 1，分离于美国加州被石油污染的土壤，经鉴定为 测定水体中油的含量。红外光谱法操作繁琐，测 不动杆菌(Acinetobactersp)。石油烃，用y(0。柴 试结果易受非烃类有机物的干扰¨…。重量法原 油)／y(93。汽油)为1的均匀混合物(简称混合 理虽然简单，但操作繁琐，误差相对较大，灵敏度 油，下同)模拟石油烃，所用0。柴油和93’汽油均 低…1。气相色谱法虽然灵敏度高，但费用较高。 与这些测试方法相比，紫外分光光度因具有精密 度好、灵敏度高、操