USP29-2s 61-非无菌产品的微生物检查：微生物的计数检查 中文译稿.doc.doc

＜61＞　微生物试验 （61）非无菌产品的微生物检查：微生物计数试验 序言 后面描述的试验对可在好氧条件下生长的嗜温细菌和真菌进行定量计数。 设计此试验主要是为了确定一种原料药和制剂的微生物质量是否符合已建立的质量标准。作此用途时，遵循下面给出的说明，包括采样编号，并按照下面的说明判定结果。 此方法不适用于以活的微生物作为活性成份的产品。 也可以使用其它的微生物规程，包括自动化方法，只要它们和已经证明的药典方法等效。 通用规程 在设计好的条件下进行检定，避免供试品受到外部微生物的污染。避免污染所采取的预防措施必须不影响试验中出现的任何微生物。 如果供试品中含有抑菌活性，那么应当尽可能的将其去除或中和。如果用灭活剂来达到此目的，那么必须证明其有效性以及对微生物不具有毒性。 如果表面活性剂用于样品制备，那么必须证明其对微生物的无毒性及与所用灭活剂的相容性。 计数方法 如下所示，使用膜过滤法或平板计数法其中一种。通常微生物计数用最大几率计数（MPN）法是最不精确的；但是，对生物负荷极低的特定产品组，它可能是最为适宜的方法。 选择方法取决于这些因素，如产品性质及要求的微生物限度。选择的方法必须允许对足量的样品量进行试验，从而判断是否符合质量标准。必须建立所选方法的适用性。 促生长试验和计数方法的适用性 一般考虑 必须建立实验检出供试品中所含微生物的能力。 如果试验操作或产品方面引入了可能影响试验结果的变更，则必须确认适用性。 试验菌株的制备 使用标准化的稳定试验菌悬液，或者按下述说明制备。使用种子批培养保存技术（生产菌种系统）以便从原始主种子批中取出用于接种的活菌传代不超过5次。每种细菌和真菌试验菌株的生长情况在表1中分别详细说明。 使用pH 7.0的氯化钠-蛋白胨缓冲液或pH 7.2的磷酸盐缓冲液制备试验悬液；为了悬浮黑曲霉孢子，可加入0.05%的聚山梨醇酯80（吐温80）。在2小时内使用悬液，如果在2°到8°保存，可在24小时内使用。制备并稀释黑曲霉或枯草芽孢杆菌的营养细胞新鲜悬液的替代选择，是制造一个稳定的孢子悬液，然后将适量的孢子悬液用于试验接种。稳定的孢子悬液可在2°到8°保存，保存时间是一个经过验证的时间。 表1.试验微生微的制备和使用 Microorganism 微生物 Preparation of Test Strain 试验菌株的制备 Growth Promotion 促生长 Suitability of Counting Method in the Presence of Product 在使用产品的情况下，计数方法的适用性 Total Aerobic Microbial Count 好氧菌总数 Total Yeasts and Molds Count 酵母和霉菌总数 Total Aerobic Microbial Count 好氧菌总数 Total Yeasts and Molds Count 酵母和霉菌总数 Staphylococcus aureus such as ATCC 6538, NCIMB 9518, CIP 4.83,orNBRC 13276 金黄色葡萄球菌，如ATCC 6538, NCIMB 9518, CIP 4.83，或NBRC 13276 Soybean-Casein Digest Agar or Soybean-Casein Digest Broth 30°-35° 18-24 hours 大豆酪蛋白胨消化琼脂或大豆酪蛋白胨消化肉汤 30°-35° 18-24小时 Soybean-Casein Digest Agar and Soybean-Casein Digest Broth ≤ 100 cfu 30°-35° ≤ 3 days 大豆酪蛋白胨消化琼脂和大豆酪蛋白胨消化肉汤 ≤ 100 cfu 30°-35° ≤ 3 天 Soybean-Casein Digest Agar/MPN Soybean-Casein Digest Broth ≤ 100 cfu 30°-35° ≤ 3 days 大豆酪蛋白胨消化琼脂/MPN大豆酪蛋白胨消化肉汤 ≤ 100 cfu 30°-35° ≤ 3 天 Pseudomonas Aeruginosa such as ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118, or NBRC 13275 铜绿假单孢菌，如ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118, 或NBRC 13275 Soybean-Casein Digest Agar or Soybean-Casein Digest Broth 30°-35° 18-24 hours 大豆酪蛋白胨消化琼脂或大豆酪蛋白胨消化肉汤 30°-35°