4分子生物学检测技术.pdf

4.分子生物学检测技术 4.1 免疫分析技术 4.1 免疫分析技术 4.2 DNA测序 免疫技术 抗原抗体反应 特异性 4.3 核酸分子杂交 标记技术 示踪物标记 灵敏性 4.4 生物芯片技术 4.5 PCR技术 反应原理 4.1 免疫分析技术 竞争法  放射免疫分析  荧光免疫分析 双抗原  酶联免疫吸附 夹心法  发光免疫分析  胶体金免疫分析 俘获法  免疫磁性粒子 免疫分析基本操作步骤 间接法 待测样品 包被抗体或抗原的反应管 反应 洗涤 标记抗体或抗原 双抗体 反应 夹心法 待测Ag 洗涤去除未结合的反应物 （三明治法） 直接检测或 加入底物 仪器检测 1 竞争性放射免疫分析 放射免疫技术 Radioimmunoassay,RIA *Ag + Ab → *AgAb Ag + Ab → AgAb 抗原抗体结合反应的特异性＋放射性检测的高灵敏度 已知过量  竞争性放射免疫分析 *Ag Ab 已知限量 (Radioimmunoassay,RIA) 低于*Ag  结合性放射免疫分析 (Immunoradiometricassay,IRMA) 待测Ag 标记抗原 结合性放射免疫分析 + *AgAb • 单位点IRMA 结合率＝ *AgAb + *Ag(游离) 结 率 合 ( % )