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13．Tridecandioicacid
ItsFermentation
to
DisseIrtationSubmitted
of
Technology
NanjingUniversity
the
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panial如1filhnent
forthe of
degree
MasterofScience
By
Zhou
HaiyaIl
Asso．Prof．HoushengHong
Supervisors：
June2008
本论文进行了十三碳二元酸(DCAl3)的菌株选育及发酵优化研究，初步研究
了改变细胞通透性对二元酸生产的影响。主要研究内容和实验结果如下：
(1)以初筛得到的热带假丝酵母菌为出发菌株，通过紫外照射和亚硝酸钠诱
变处理，经平皿筛选、摇瓶筛选和连续传代试验，获得一株十三碳二元酸的高产
I拘产
菌株踟砌如乃印觑如C乃3。该菌株在未优化的工艺条件下发酵，DCAl3
量较未诱变前提高到194％。经试验验证，菌株C册硪如乃Dpfc耐豇C乃3的遗传
性能稳定。
(2)研究了菌株C册旃如乃印fc口胁C乃3的摇瓶发酵条件。优化的发酵工艺
条件为：摇床转速l80r／mill，500mL摇瓶装液量50mL。
(3)优化了菌株C册幽妇乃印fc口胁C乃3的发酵培养基组成。应用响应面分
析法获得培养基组成中对产酸的影响较显著的两个因子：Ⅺ＆P04和N啦c，分
析得出其在发酵培养基中最优含量分别为0．572％(W厂v)和0-316％(W厂叻。
0．8％，NaCl
0．57％，Na2HP04
(4)优化后的培养基组成为(W厂V)：KH2P04
O．0l％，
0．1％，(NH4)2S040．5％，酵母膏0．5％，蔗糖3％，尿素O．15％(分消)，VBl
O．32％，nCl3
MgS04·7H20O．15％(分消)，玉米浆O．1％，NaAc 10％(分消)，pH7．0。
采用优化后的培养基组成进行摇瓶发酵，产酸量较优化前提高了20．6％。
(5)研究了化学调控方法改变细胞通透性对二元酸产量的影响。试验结果表
明，在合适的时间添加适量的氯仿、乙酸丁酯和表面活性剂T-80均可促进酸产
量的提高。
(6)研究了物理调控方法改变细胞通透性对二元酸产量的影响。试验结果表
明，最适的连续超声时间为2分钟；采用间歇式超声则在超声功率500W，超声
总工作时间8分钟的超声条件下，发酵液中二元酸提高量达到了4．49／L。
本论文的主要创新之处在于将声化学控制手段引入生物发酵技术中，初步研
究了超声技术改变细胞通透性对二元酸生产的影响。
关键词：热带假丝酵母菌菌种诱变细胞通透性响应面分析法二元酸
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