酶联免疫法测定知母中菝葜皂苷元的含量-《中国药科大学学报》！.pdf

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１０，４１（４）：３６３－３６６ ３６３ 酶联免疫法测定知母中菝葜皂苷元的含量 １ １ ２ １，２ 王　晶，刘吉华 ，张　剑 ，余伯阳 １ ２ （中国药科大学中药复方研究室，南京２１１１９８；中国药科大学现代中药重点实验室，南京２１０００９） 摘　要　应用菝葜皂苷元多克隆抗体建立检测知母中菝葜皂苷元含量的酶联免疫分析方法，结果显示其检测线性范 围为２０～１３１１ｎｇ／ｍＬ，最低检出浓度为２０ｎｇ／ｍＬ。样品加样回收率为９２２％～９７１％，日内日间ＲＳＤ均小于１４３％。以 所建立的方法检测５个产地知母中菝葜皂苷元的含量，检测结果与ＨＰＬＣＥＬＳＤ分析结果一致。本实验建立的菝葜皂苷元 免疫分析方法具有简便、灵敏、快速的特点，可简化中药复杂体系中单一成分的含量测定。 关键词　酶联免疫法；多克隆抗体；菝葜皂苷元；知母 中图分类号　Ｒ９１７　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１０）０４－０３６３－０４ Ａｎｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓａｒｓａｓａｐｏ ｇｅｎｉｎｉｎＲｈｉｚｏｍａＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａｅ １ １ ２ １牞２ ＷＡＮＧＪｉｎｇ牞ＬＩＵＪｉｈｕａ牞ＺＨＡＮＧＪｉａｎ牞ＹＵＢｏｙａｎｇ １ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｏｍｐｌｅｘＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１１１９８牷 ２ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｏｄｅｒｎＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｕｓｉｎｇｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎ牞ａｎｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ牗ＥＬＩＳＡ牘 ｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎｉｎＲｈｉｚｏｍａＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａｅｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄＴｈｅｌｉｎｅａｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｎｇｅｏｆ ｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎｗａｓ２０１３１１ｎｇ／ｍＬＴｈｅｌｏｗｅｓｔｌｉｍｉｔｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎ牗ＬＯＤ牘ｏｆｔｈｅａｓｓａｙｗａｓ２０ｎｇ／ｍＬ牞ａｎｄｔｈｅｒｅ ｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ９２２％ｔｏ９７１％Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｆｏｒｉｎｔｒａａｎｄｉｎｔｅｒａｓｓａｙｓｗｅｒｅｌｅｓｓ ｔｈａｎ１４３％Ｔｏｖａｌｉｄａｔｅｔｈｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ牞ｔｈｅｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆＲｈｉｚｏｍａＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａｅｆｒｏｍ５ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｔｈｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙａｎｄＨＰＬＣＥＬＳＤＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｔｈｅｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅｃｏｎ ｓｉｓｔｅｎｔＴｈｉｓｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｉｓｓｉｍｐｌｅ牞ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｒａｐｉｄ牞ａｎｄｃｏｕｌｄｓｉｍｐｌｉｆｙｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｉｎｇｌｅｃｏｍｐｏ ｎｅｎｔｓｉｎｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｙｓｔｅｍ Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ＥＬＩＳＡ牷ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ牷ｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎ牷ＲｈｉｚｏｍａＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａｅ ＴｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ牗Ｎｏ０８０７１牘牷ａｎｄｔｈｅＰｒｏｇｒａｍｆｏｒＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅｓ ＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓｏｆＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ牗ＮｏＣＸ０８Ｂ＿１９２Ｚ牘 　　知母为百合科植