耐温性L 谷氨酸发酵菌种的选育 - 生物加工过程.PDF

第７卷第６期 生　物　加　工　过　程 Ｖｏｌ．７Ｎｏ．６ ２００９年１１月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｏｖ．２００９ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１７６２－３６７８．２００９．０６．０１５ 耐温性Ｌ 谷氨酸发酵菌种的选育 刘　苗，郑　璞，杜巧燕，刘小德，倪　晔，毛忠贵，孙志浩 （江南大学　生物工程学院，工业生物技术教育部重点实验室，无锡 ２１４１２２） 摘　要：应用基因组改组技术提高Ｌ谷氨酸生产菌在高温发酵条件下的谷氨酸产量。以天津短杆菌Ｔ６ １３变异 株ＳＷ０７ １为原始亲株，分别经紫外线（ＵＶ）硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和Ｘ射线诱变，获得５株耐温性能略有提高的突 变菌株。经２轮基因组改组，获得耐高温（能在４４℃生长）的Ｌ谷氨酸菌株Ｆ２ ５０。Ｆ２ ５０在３８℃下，摇瓶发酵 ４０ｈ，发酵液中Ｌ谷氨酸浓度比原始出发菌株提高了近４１％，在４１℃高温下，摇瓶发酵４０ｈ，Ｌ谷氨酸浓度比原 始出发菌株提高了近２倍。 关键词：基因组改组；Ｌ谷氨酸；耐温性 中图分类号：Ｑ９３３　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－３６７８（２００９）０６－００７４－０５ ＢｒｅｅｄｉｎｇｏｆａｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｔＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｉａｎｊｉｎｅｓｅｆｏｒ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇＬｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄ ＬＩＵＭｉａｏ，ＺＨＥＮＧＰｕ，ＤＵＱｉａｏｙａｎ，ＬＩＵＸｉａｏｄｅ，ＮＩＹｅ，ＭＡＯＺｈｏｎｇｇｕｉ，ＳＵＮＺｈｉｈａｏ （ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ， ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＪｉａｎｇｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｂｒｅｅｄｉｎｇｏｆｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｔＬｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄｐｒｏｄｕｃｉｎｇｓｔｒａｉｎｂｙｇｅｎｏｍｅｓｈｕｆｆｌｉｎｇｗａｓｉｎｖｅｓ ｔｉｇａｔｅｄ．ＡｖａｒｉａｎｔｏｆＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｉａｎｊｉｎｅｓｅＴ６１３，ＳＷ０７１ｗａｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｐａｒｅｎｔｓｔｒａｉｎ．Ｆｉｖｅｍｕｔａｎｔｓ ｗｉｔｈｓｕｂｔｌｅｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｏｆｈｅａｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｗｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｂｙＵＶＤＥＳ（ｄｉｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｔｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ）ａｎｄＸｒａｙｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＡｓｔｒａｉｎＦ２５０ｃａｐａｂｌｅｏｆｇｒｏｗｉｎｇａｔ４４℃ ａｎｄｗｉｔｈｈｉｇｈｅｒ Ｌｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄｐｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｓｅｃｏｎｄｒｏｕｎｄｇｅｎｏｍｅｓｈｕｆｆｌｅｄｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｅＬｇｌｕ ｔａｍｉｃａｃｉｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＦ２５０ｗａｓ０４１ａｎｄ２ｔｉｍｅｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｓｔｒａｉｎａｔ３８℃ａｎｄ４０ ℃，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｅｎｏｍｅｓｈｕｆｆｌｉｎｇ；Ｌｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄ；ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｃｅ 　　选育优良的生产菌种一直是味精发酵工业中 高温和高产性状并不是由１个或数个基因控制，它 ［１］ 主要的研究课题之一 。温度是谷氨酸发酵控制 涉及到大量的基因产物及其相关的代谢途径。在 的主要参数之一，谷氨酸生产菌株的耐高温性能直 这些作用机制未完全阐明以前，用基因工程等理性 接与生产效益相关，提高谷氨酸菌株的耐高温性能 育种手段，较难同时提高谷氨酸菌的耐高温和高产