菌药物敏感性试验和细菌耐药性的检查.PPT

THANK YOU 抗菌药物敏感性试验和细菌耐药性的检查  实验诊断学教研室 王 倩 THANK YOU 内容与要求 抗菌药物敏感性试验适应症(了解) 药敏试验常用抗菌药物选择与分组(了解) 药敏试验结果表示及其临床意义 (掌握) 细菌耐药机制及常见耐药菌检测(了解) 1.概述 青霉素的发现开创了抗生素的新纪元 1.概述 1.1 抗菌药物敏感性试验概念 抗菌药物敏感性试验（antimicrobial susceptibility test, AST）简称药敏试验，指在体外测定抗菌药物抑制或杀灭细菌的能力，即测定细菌对抗菌药物的敏感性（或耐药性）。 1.概述 1.2 抗菌药物敏感性试验目的与适应症 1.2.1 药敏试验目的： 1）为临床选用抗菌药物提供信息 2）对常见病原菌耐药状况监测，经验用药 3）评价新药的抗菌药效 4）分析医院感染流行株药敏谱，为单株流行提供依据。 1.概述 1.2 抗菌药物敏感性试验目的与适应症 1.2.2 药敏试验适应症： 当某些致病菌或条件致病菌的药敏特点不能从种属特征了解或 其药敏结果易变时，其临床分离株必须进行药敏试验。 1.2.3 下述情况不必进行药敏试验： 1）标本中分离出多种细菌, 分离菌可能是污染菌 2）某致病菌对某抗菌药物高度敏感而从未见有耐药情况报告 3）分离自正常寄生部位的条件致病菌和非致病菌 1.概述 1.3 药敏试验用药的选择与分组 1.3.1 常用抗菌药物： 1）β-内酰胺类 2）糖肽类 3）氨基苷类 4）大环内酯类 5）四环素类 6）喹诺酮类 7）磺胺类和甲氧苄氨嘧啶 1.概述 1.3.2 药敏试验用药的分组： 临床实验室标准化研究所（Clinical Laboratory Standards I，CLSI）将抗菌药物分成A、B、C、U四组 1.概述 1.3.2 药敏试验用药的分组 A组：常规药敏试验的首选药物，应常规报告 1.概述 1.3.2 药敏试验用药的分组 B组：包含针对医院感染的药物，亦可作为首选药物，选择性报告临床。 （csf、多种细菌、多部位感染、A组药物过敏或耐药，流行病学目的向感控部门报告） 1.概述 1.3.2 药敏试验用药的分组 C组：替代性或补充性的抗菌药物 1.概述 1.3.2 药敏试验用药的分组 U组：仅用于治疗泌尿道感染的抗菌药物 1.概述 1.4 药敏试验结果表示及其临床意义 ■ 敏感（susceptible, S) 使用常规推荐剂量的抗菌药物治疗，该药在感染部位达 到的浓度可抑制细菌生长。 ■ 耐药（resistant, R) 使用常规推荐剂量的抗菌药物治疗，该药在感染部位达 到的浓度不能抑制该菌生长。 ■ 中介（intermediate, I) 测试菌能被药物大剂量给药后在体内达到的血药浓度所 抑制，或在测定药物浓集部位的体液（如尿）中被抑制。 1.概述 1.4 药敏试验结果表示及其临床意义 ■ 剂量依赖敏感（susceptible-dose dependent, SDD) 主要用于真菌的药敏试验，相当于细菌药敏试验的“中介”。 ■ 不敏感（nonsusceptible，NS） 新的抗菌药早期的解释标准只有敏感折点，当某分离株MIC值 高于敏感折点，报告为不敏感。 2.抗菌药物敏感性试验 2.1 常用的药敏试验 2.1.1 纸片扩散法（K-B法）：定性方法 2.1.2 稀释法：定量方法，测定MIC 1）肉汤稀释法 2）琼脂稀释法 纸片扩散法 2.抗菌药物敏感性试验 2.1 常用的药敏试验 2.1.3 浓度梯度纸条扩散法（E试验）： 定量方法测定MIC 结合纸片法和稀释法原理设计。 E试验 3.细菌耐药性的检测 3.1 细菌的耐药机制 3.1.1 细菌产生灭活抗生素的各种酶 β-内酰胺酶、氨基糖苷修饰酶 3.1.2 细菌改变药物作用的靶位 青霉素结合蛋白（PBP）、肽聚糖交联靶位改变、 DNA拓扑异构酶 3.1.3 细胞膜通透性改变及对药物主动外排 3.1.4 细菌生物膜的形成 3.细菌耐药性的检测 3.2 细菌耐药表型的检测 3.2.1 直接β-内酰胺酶的检测 头孢硝噻吩纸片法：直接挑取菌落涂抹头孢硝噻吩纸片，纸片由黄色变为红色为阳性。 β-内酰胺酶阳性：提示对青霉素酶