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试管动物 试管动物技术： 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经 产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 移植 试管动物技术的三个基本操作环节： 第一步：体外受精 （1）卵母细胞的采集与培养 （2）精子的采集与获能 （3）受精 第二步：胚胎的早期培养 第三步：胚胎移植 一、体外受精技术 方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 1.卵母细胞的采集与培养 方法2：从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞，在体外培养成熟 操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 活体卵巢中采集卵母细胞 （1）采集的方法: 假阴道法、手握法、 电刺激法 （2）获能处理: 培养法：(人工配制的获能液中培养）用于啮齿动物、家兔和猪 化学法：（一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，化学药物诱导）用于牛、羊等大型哺乳动物 2、精子的采集和获能 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 3、体外受精 二、胚胎的早期培养 二、胚胎的早期培养 1、发育培养液成分 : 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等. （1）不同动物胚胎移植的时间不同 牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚试管婴儿：8个或16个细胞阶段 2、胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 （2）胚胎冷冻保存就是将动物的早期胚胎,采用特殊的保护剂和降温措施进行冷冻,使其在-196℃的液氮中代谢停止或减弱到足够小的程度,但又不失去升温后恢复代谢的能力,从而能长期保存胚胎的一种生物技术。 世界上第一位试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。如今自己也已经当上了妈妈。图为她抱着自己的两个双胞胎孩子，这对双胞胎也是试管婴儿。??? 1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生 试管动物克隆动物转基因动物 1.（10海南卷）请回答胚胎工程和基因工程方面的问题： （1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母体中发育和产出等过程。 （2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其＿＿。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和＿＿＿＿＿。 （3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 1.（10海南卷）请回答胚胎工程和基因工程方面的问题： （4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是＿＿＿＿＿＿＿、基因表达载体的构建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺细胞）。 2.(2015年山东）治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。 （1）过程①采用的是细胞工程中的???????技术，过程②采用的是胚胎工程中的???????技术。 （2）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液的?????。 （3）如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体（重组载体）时必须用??????和?????两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有???基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。 （4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的???????。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体????? （填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。 3.（2012山东卷）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。 （１）过程①中最常用的运载工具是______，所需要的酶是限制酶和_________。 （２）在过程②中，用_______处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的