培养基与常用设计容器.docVIP

《生物工艺》课程单元教学设计 ------------- 培养基及常用器皿的灭菌方案设计 一、教案头 本次课标题：培养基及常用器皿的灭菌方案设计 授课班级 略 上课时间 4课时 上课地点 略 教 学 目 标 能力目标 知识目标 素质目标 1、能针对不同的器皿选择合适的灭菌方法。 2、能够进行培养基的灭菌处理 1、掌握常用的灭菌方法及适用范围。 2、掌握培养基灭菌的方法及灭菌效果的检验方法。 1、具备一定沟通能力 2、团队协助能力 3、培养实验素质 能力训练任务及案例 训练任务： 1、每组汇报制定的常用器皿的灭菌方案。 2、各组示范一种灭菌方法。 3、各组将指定的器皿和培养基灭菌。 成果 1、实验室器皿和培养基的灭菌方案。 2、各种器皿灭菌后经无菌检验合格。 3、培养基灭菌后经无菌检验合格。 参考资料 《工业微生物学实验》、《氨基酸发酵工艺学》、《生化工艺学》、南京化工职业技术学院生化社团培训资料 二、教学设计 项目背景：“南化生物公司”由于建设初期人员比较紧张，故招收了一些临时工，这些工人主要负责实验室常用器皿的灭菌和培养基等灭菌，现在需要对这些员工进行培训，请各小组拟定一个培训计划。要求培训后这些员工能够独立完成实验室的所有灭菌工作。 第一步：各组汇报编制的培训方案 35分钟 1、实验室常用仪器及器皿的清洗及包扎方法； 2、各种器皿的灭菌方法及操作注意事项； 3、培养基灭菌方法 4、灭菌锅使用说明及操作注意事项； 5、灭菌后培养基无菌检验方法； 第二步：讨论：1、玻璃器皿灭菌方法主要有哪些？ 20分钟 -------干热灭菌和湿热灭菌 2、培养基能否用干热灭菌？ -------不能，其中水分会流失 3、火焰灼烧法适用哪些器材灭菌？ --------接种环 涂布棒 接种针等小型器皿 4、哪种灭菌方法最好？ --------火焰灼烧法 但是适用面窄 5、玻璃器皿灭菌为什么用牛皮纸包扎？ -----------防止拿出后有微生物沉降到表面 6、吸管灭菌要注意什么？ ------------吸头要加棉花，但是不能塞的过紧 第三步：总结培养基及常用器皿的灭菌方法 20分钟 1、常见灭菌方法 -----化学灭菌法 射线灭菌法 干热灭菌法 湿热灭菌法 过滤除菌法 灼烧灭菌 2、常用的化学灭菌剂有哪些？ -----KMnO4:0.1%~0.25% 皮肤消毒 -----漂白粉：2%~5% 环境消毒 -----乙醇：70%~75% 皮肤消毒 器皿消毒 -----石碳酸：1%~5% 桌面消毒 浸泡衣物 空间环境消毒 -----甲醛：1%~2% 空气消毒 （10~15mL/m3）熏蒸4h -----铵盐（新洁尔灭）：0.1~0.2% 皮肤、器具、环境消毒 3、射线灭菌的有效波长。 ------260nm 4、干热灭菌原理及适用范围 ------加热使微生物体内的蛋白质变性，电解质浓缩，引起中毒导致微生物死亡 -----160~170℃ 1~1.5h -----适用于要求保持干燥的实验器具和材料 5、湿热灭菌原理及应用 -----利用饱和蒸汽释放的热能，使蛋白质、酶及核酸分子内部化学键破坏，引起不可逆的变性，导致微生物死亡。 ------121℃，30min 6、过滤除菌适用范围 -----适用于澄清流体除菌。 7、火焰灼烧法 -----适用实验室小型器皿灭菌（接种针、接种环、涂布棒等） 8、培养基灭菌的理论基础。 第四步：讨论各组项目报告中的问题。 15分钟 -------器皿的包扎方法 -------灭菌锅的使用手册 ------干热灭菌注意事项 第五步：项目方案实施（实验室操作） 75分钟 1、实验室常用器皿的包扎 2、各种器皿的灭菌方法（玻璃器皿、枪头等） 3、培养基的灭菌（各组将配制的培养基灭菌，主要要求掌握灭菌