吖啶橙荧光染色法在消化系肿瘤诊断中的临床意义.pdfVIP

758 重庆医学2008年4月第37卷第7期 · 经验交流 · 吖啶橙荧光染色法在消化系肿瘤诊断中的临床意义 黄玲莎，王 英，刘立义，黄文成，陈桂言 (广西医科大学附属肿瘤医院，南宁530021) 摘 要：目的 探讨吖啶橙荧光染色检测法对消化系肿瘤的诊断价值。方法 对100例胃癌、5O例肠癌、5O例食管癌、3O例 肝癌患者，进行内窥镜及细针肿物穿刺取材，将标本同时做吖啶橙荧光染色检测及组织病理学检查。结果 吖啶橙荧光染色检测 对肠癌、胃癌、食管癌、肝癌的检出率分别为64 、46 、38 、33．3 ，总检出率为46．5 。结论 吖啶橙荧光染色检测法对肠癌 的诊断意义较高，对胃癌、食管癌、肝癌有一定的诊断意义，与术前病理学同时检查可起到互补作用，提高诊断率。 关键词：吖啶橙荧光染色；消化系肿瘤；诊断 中图分类号：R735；R730．43 文献标识码：B 文章编号：1671—8348(2008)07—0758—02 消化系肿瘤的发病率及死亡率居各种恶性肿瘤之首，目前 表2 荧光染色检测结果与术前组织病理学 诊断消化系肿瘤主要是采用内窥镜取材做传统巴氏细胞学及 检查结果比较( ) 组织病理学检查( 。I。为了提高消化系肿瘤早期诊断的阳性 率，作者于2004年3月～2006年9月通过对 230例消化系恶 性肿瘤患者进行内窥镜及细针肿物穿刺取材，将标本同时做吖 啶橙(AO)荧光染色检测及组织病理学检查，其研究结果如下。 1 临床资料 1．1 一般资料 230例均为本院消化系恶性肿瘤住院患者， 男153例，女77例，年龄21～77岁。均经术前或术后组织病 3 讨 论 理学证实。其中胃癌100例、食管癌5O例、肠癌5O例、肝癌3O 3．1 吖啶橙是一种特异性荧光染料，其荧光素与细胞核中的 例。 DNA结合后，形成AO-DNA复合体；与细胞浆中的RNA结合 1．2 方法 胃、食管、直结肠标本通过内窥镜取材，肝脏标本 后，则形成AO—RNA复合体。经荧光显微镜紫外激发光进行 通过细针穿刺取材，涂片1～2张，95 酒精固定，15rain后水 辐射后，细胞即可发射不同颜色的荧光，AO—DNA复合体发出 洗，滴加0．01O浓度的吖啶橙荧光染液染色 5rain，用pH6．0 黄色或黄绿色荧光，AO—RNA复合体发出桔黄色或桔红色荧 的磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗 lmin，然后用0．1mol／L氯化钙溶 光。荧光的强度与核内DNA与浆内RNA的含量成正比例关 液分色 lmin，再用 pH6．0的PBS冲洗、封片。使用 激发滤 系。DNA含量越多，荧光越黄越亮；RNA含量越多，荧光越红 片，530W阻断滤片，在落射式荧光显微镜下观察。所有病例 越鲜艳_4]。从正常细胞转变为癌细胞，其细胞的DNA、RNA 均同时取材做组织病理学检查。 含量不断增加，经AO染色，在荧光显微镜下，通过单个细胞的 1．3 诊断标准 根据细胞核和浆的荧光强度来分级，标准如 形态及鲜艳的荧光，即可作出诊断，不用观察组织结构改变，这 下[3]：核荧光较弱，呈淡绿黄色为十十；核荧光较强，呈亮黄绿 就是A0染色的优点。本研究对 230例消化系恶性肿瘤标本， 色为+++；核荧光强，呈明亮黄色为++++。浆较暗荧光，