第三临床医学院LOGO 小结沉淀反应.PPT

第五章 凝聚反应和沉淀反应 教学内容 第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应和间接凝集反应 教学目的与要求 第四节 沉淀反应特点 沉淀反应（precipitation） 是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。 一　液体内沉淀试验 （一） 环状沉淀试验 是将已知抗血清和待检抗原反应，在液面交界处特异性结合形成白色环状沉淀。 　免疫电泳技术 　免疫电泳技术 结果分析： 无沉淀线出现则表明无相应的抗原。 沉淀线位于抗原抗体孔中间，说明两者比例较适合。 沉淀线偏向抗原孔一方，表示抗体浓度＞抗原，反之，则是抗体浓度＜抗原浓度。 　免疫电泳技术 小 结 思考题 选择题 1.对流免疫电泳中，抗体向阴极移动原因是 A.抗体带正电????? B.抗体带负电??????? 　　 C.扩散作用 　　 D.电泳作用??? 　　 E.电渗作用 2. 影响沉淀试验的因素包括 A.抗原与抗体的比例???B.温度?? 　　 C.盐浓度?? 　　 D.以上三项????? 　　 E.仅B+C 3. 单向琼脂扩散法最常用于 A.抗体定性?????? 　　B.抗体定量?????? 　　 C.抗原定性? 　　 D.抗原定量 　　 E.免疫复合物定量 4. 抗原抗体反应形成明显沉淀物条件为： A．抗原显著多于抗体?????????????? B．抗体略多于抗原????????????? C．抗原抗体比例合适 D．抗体显著多于抗原?????????????? E．抗原略多于抗体 5. 单向琼脂扩散法的检测敏感度 A.不高，检测时间长达48～72小时 B.高，检测时间长达48～72小时 C.不高，检测时间仅需12小时 D.高，检测时间仅需12小时 E.高，检测时间仅需2小时 填空题 1.火箭免疫电泳的原理： 和 相结合的定量检测技术 2. 免疫固定电泳的原理： 和 相结合的一门技术。 3. 免疫电泳的原理： 和 相结合的一门技术。 4. 对流免疫电泳的原理： 和 相结合的一门技术。 问答题 1.什么是沉淀反应？比较沉淀反应与凝集反应的不同之处。 2.沉淀反应的特点？ 3.单向扩散试验的原理和应用？单向琼脂扩散试验有那些影响因素？ 4.免疫固定电泳的原理及临床应用价值？ 　凝胶内沉淀试验 3.抗原性质的分析 第三临床医学院 　凝胶内沉淀试验 4.抗体效价的滴定 5.抗原或抗体纯度 的鉴定 第三临床医学院 第六节　免疫电泳技术 (immunoelectrophoresis technique) 第三临床医学院 免疫电泳技术 电泳分析 沉淀反应 抗原抗体反应的高度特异性 电泳技术的高分辨率、快速、微量 基本原理 　免疫电泳技术 第三临床医学院 对流免疫电泳 (counter immunoelectrophoresis) 免疫固定电泳(immuno fixationel ectrophoresis) 免疫电泳(immunoelectrophoresis) 火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis ) 1 2 3 4 分类 　免疫电泳技术 第三临床医学院 双向扩散 对流免疫电泳 电泳 比双向扩散试验灵敏度提高8-16倍 　免疫电泳技术 对流免疫电泳基本原理 第三临床医学院 通电 － 蛋白质抗原常带较强的负电荷，在电场中向正极移动 抗体球蛋白 带负电荷较少，籍电渗作用向负极泳动 ＋ 对流免疫电泳 第三临床医学院 第三临床医学院 　免疫电泳技术 对流免疫电泳 第三临床医学院 单向免疫扩散 火箭免疫电泳 电泳 抗体浓度固定时，峰的高度与抗原量呈正相关。 　免疫电泳技术 火箭免疫电泳基本原理 第三临床医学院 　　　　火箭免疫电泳图 ①②③④为标准抗原；⑤⑥为标本 - + 火箭免疫电泳示意图 　免疫电泳技术 第三临床医学院 火箭免疫电泳 　免疫电泳技术 沉淀峰的高度与抗原的浓度成正比。 第三临床医学院 双向扩散 免疫电泳 区带电泳 纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定。 　免疫电泳技术 免疫电泳基本原理 第三临床医学院 免 疫 电 泳 原 理 图 解 第三临床医学院 　免疫电泳技术 - + 免疫电泳示意图 　免疫电泳技术 第三临床医学院 沉淀反应 免疫固定电泳 区带电泳 分辨率强，敏感度高，操作周期短，仅需数小时，结果易于分析。 　免疫电泳技术 免疫固定电泳基本原理 第三临床医学院 　左图为I