聚合物在生物高分子分离中的应用-高分子科学与工程系-中国科学.PDF

聚合物在生物高分子分离中的应用 中国科学技术大学 高分子科学与工程系 王延梅 E-mail:wangyanm@ustc.edu.cn Tel. 0551 内容 1. 分离过程及原理 2. 聚合物在DNA分离中的应用 3. 聚合物在蛋白质分离中的应用 1. 分离过程及原理 定义：将一定样品中相关的化学物质拆解成纯的物质称为分离。 方法：萃取、过滤、离心、色谱、电泳等。 实质：混合的逆过程。混合是自发的，分离是被动的，需要能量或外力的推动。 原理：差速运动过程，即利用速度差别进行物质的分离与纯化， 分离方法及其对应作用力 电泳：带电粒子在电场作用下于一定介质（溶剂）中所发生的运动。 电泳分离及其条件选择的依据：离子所带电荷越多、解离度越大、体积越小、 溶液的黏度越小，电泳速度越快。 电渗：毛细管中的溶剂因轴向直流电场作用而发生的定向流动，起因于定域 电荷。 定域电荷：牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移的离子或带电基团。 电渗的方向：与固体表面电荷所具有的电泳方向相反； 电渗的强度: 与定域离子的数量或固液界面成正比；与流路通道孔径有关。 熔融硅毛细管中的电渗 产生指向负极的电渗 定域电荷 CE工作原理 例：当把样品从正极端注入到石英毛细管中时，不同符号的离子将按表中的速度 向负极迁移。 组分 合淌度 合速度 正离子    vH  vem  vos H em os 中性分子   v  v H os H os 负离子    v  v  v H os em H os em 电迁移率：em v / E 电渗率：os 2 ．聚合物在DNA分离中的应用 人类基因组计划（Human Genome Project －HGP ） 1986年，著名生物学家、诺贝尔奖获得者H. Dulbecco 提出人类基因组计划。1990年正式启动，其主要目标有： 识别人类DNA 中所有基因（超过10万个）；测定组成人类 DNA 的30亿碱基对的序列；将这些信息储存到数据库中； 开发出有关数据分析工具；致力于解决该计划可能引发的 伦理、法律和社会问题。 遗传学 核酸(DNA和RNA)的功能：储存和传递信息，指导和控制蛋白质的合成。 DNA:主要的遗传物质，通过复制而将信息由亲代传给子代。 RNA:与遗传信息在子代的表达有关。 刑侦学 DNA 的组成 腺嘌呤(A) 鸟嘌呤(G) 胸腺嘧啶(T) 胞嘧啶(C) DNA 的结构 毛细管电泳分离DNA 的过程 电渗是CE的基本现象之一，它可以控制组分的迁移速度和方向，进 而影响CE的分离效率和重现性． DNA 的分离理论 高分子溶液的分类 de Gennes将高分子溶液分为稀、亚浓和浓溶液三类。 稀溶液：cc* c*：临界缠结浓度，即高分子线