雷帕霉素对肺癌a549细胞球增殖和上皮-间质转化的 - tumor - 肿瘤.pdf

TUM OR Vol. 35, February 2015　肿瘤　　 139 Basic Research 基础研究 · 雷帕霉素对肺癌A549细胞球增殖和上皮-间质转化的作用研究 詹晓峰，涂小云，赵记华，叶小群 Effects of rapamycin on proliferation and epithelial-mesenchymal transition of lung cancer A549 cells-derived spheres ZHAN Xiao-feng, TU Xiao-yun, ZHAO Ji-hua, YE Xiao-qun [摘要]　 　 目的：研究雷帕霉素对�癌���球的作用及其相关机制。 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2015.11.633 [作者单位] 方法：应用�����培养液培养�癌A549 ��球，并采用FCM 法检测 南昌大学第二附属医院呼吸内科，江西南昌　 ��球中CD133 ＋CD44 ＋��的比例。应用20 、50 和100 ng/mL 的雷帕 330006 霉素分别�预A549 ��球，蛋白质印迹法检测雷帕霉素对磷酸化哺乳类 [中图分类号]　R734.2　[文献标志码] A 动�雷帕霉素靶蛋白 （phospho-mammalian target of rapamycin ，p-mTOR ） [文章编号]　1000-7431 (2015) 02-0139-08 表达的抑制程度，选出最佳抑制浓度。应用最佳浓度的雷帕霉素�预A549 [基金项目] ��球24 h 后，采用蛋白质印迹法检测E- 钙黏蛋白 （E-cadherin ）、波 1. 国家 自然科学基金资助项 目（编号： 形蛋白 （vimentin ）、磷酸化信号转导和转录激活因子3 （phospho-signal ） 2. 江西省 自然科学基金资助项 目（编号： transducer and activator of transcription 3 ，p-STAT3 ）、磷酸化p70 核糖体 20114BAB205001） 蛋 白S6 激 酶 （phospho-p70 ribosomal protein S6 kinase ，p-p70S6K ）和 磷酸化真核��始动因子4E 结合蛋白1 （phospho-4E binding protein 1， AUTHORS FROM p-4EBP1 ）的表达水平，实时荧光定量PCR 法检测Sox2 、Oct4 、CD133 Department of Respiratory, Second Affiliated 和Nanog 的mRNA 水平。MTT 法检测雷帕霉素�预1 ～7 d 后