苷 - 南方医科大学.ppt

* * * * * * * * * * * * * * 给结构 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 碳苷水中溶解度小,难水解 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第七节 糖链的结构测定 * 1.纯度测定 多糖纯品实质上是一定分子量范围的均一组分. 常用方法: 超离心法 高压电泳法(制成硼酸络合物) 凝胶色谱法 旋光测定法(分级沉淀,测比旋度) * 2.分子量测定 质谱法 FDMS（场解析质谱） FABMS（快原子轰击质谱） ESIMS（电喷雾质谱） MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离飞行时 间质谱） * 3.单糖的鉴定 全水解 PC,TLC: 与单糖对照品比较-鉴定糖的种类 薄层扫描:测定单糖的分子比 气相色谱, HPLC等定性定量分析 * 4.糖连接位置的测定 糖链(多糖,苷)?全甲基化?水解?甲基化单糖?气相色谱定性定量分析(游离羟基的部位为糖的连接位置) 1HNMR:全乙酰化,测1HNMR,CHOAc,CHOR, CH2OAc,CH2OR的质子信号化学位移不同 苷化位移 * 5.糖链连接顺序的确定 部分水解法:稀酸水解,甲醇解,乙酰解,碱水解等 质谱分析:FABMS, FDMS,CIMS等,分析质谱碎片(从外侧糖依次裂解) 13CNMR的弛豫时间:外侧糖的自旋弛豫时间T1比内侧糖大. 2D－NMR(H-H COSY,HMQC,HMBC,NOESY, HOHAHA等) * 6. 苷键构型的确定(?和?型) 1) 核磁共振法；糖端基质子JH1,2,;端基碳JC1,H1和 化学位移 2) 酶解法； 3) 分子旋光差法(Klyne法):将苷和苷元的分子旋 光差与组成该苷的糖的一对甲苷(?和?型)的 分子旋光度比较,数值相近的一个便是与之有 相同苷键者. 4) 红外法：α葡萄糖苷在770、780 cm-1有强吸收峰。 * * [本章小节] 常见的几种单糖的结构特征； 糖的化学性质：过碘酸氧化、Smith降解、醚化 反应、酰化反应、缩酮和缩醛反应，以及硼酸 络合反应； 苷键的裂解规律和特征； 糖的核磁共振谱学特征：糖上的质子在1H-NMR 谱及碳原子信号在13C-NMR上出现的大致位 置。根据J值判断多数糖苷端基碳原子构型。苷 化位移规律。 * * * * * 有些糖有独特的生物活性, 为有效成分，如抗肿瘤、抗肝炎、抗衰老作用。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 硼酸络合反应的应用： 1)络合后，中性可变为酸性，因此可进行酸碱中和滴定； 2)可进行离子交换法分离； 3)可进行电泳鉴定； 4)在混有硼砂缓冲液的硅胶薄层上色谱。 第四节 苷键的裂解 * 一 苷键裂解的目的和应用 为鉴定苷的结构，如糖和糖的连接方式、苷元和糖的连接方式、糖的种类、个数等。 二 苷键裂解法： 1.酸催化水解反应 2.乙酰解反应 3.碱催化水解 4.酶催化水解反应 5.氧化开裂法（Smith降解法） 1.酸催化水解反应 苷键属缩醛结构，易为稀酸水解。 反应机理：苷原子先质子化，然后断键生成阳碳离子或半椅型的中间体，在水中溶剂化而成糖。 半椅型 酸水解的规律： 难易顺序: C-苷S-苷O-苷N-苷 醇苷酚苷, 烯醇苷 2-氨基糖2-羟基糖6-去氧糖2-去氧糖 2,6-二去氧糖(苷) 吡喃糖苷呋喃糖苷; 醛糖苷酮糖苷 糖醛酸七碳糖六碳糖甲基五碳糖五碳糖 在构象相同的糖中: a键(竖键)-OH多则易水解。 芳香苷较脂肪属苷易水解。 如：酚苷 萜苷、甾苷 （因苷元部分有供电结构，而脂肪属苷元无供电结构） 苷元为小基团苷键横键比竖键易水解( e a ) （横键易质子化） 苷元为大基团苷键竖键比横键易水解( a e ) （苷的不稳定性促使其易水解） 2. 乙酰解反应 常用试剂：醋酐 + 酸 所用酸如：H2SO4、HClO4、CF3COOH或Lewis酸（ZnCl2、BF3）等。 反应条件：一般是在室温放置数天。 反应机理： 与酸催化水解相似，以