flow cytometry - 生命经纬-关注生命科学及医 .ppt

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流式细胞术 (Flow Cytometry,FCM) 1、流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理,光电测量,计算机,细胞荧光化学,单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。 2、流式细胞术(Flow Cytometry):利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速(每秒可达1000-10000个)的定量分析和分选(纯度可达99%以上)的技术。 流式细胞仪结构 ? 激光光源及光束形成系统 ? 流动室及液流驱动系统 ? 光学系统:透镜、滤光片、小孔,聚焦光源, 收集不同波长的荧光信号。 ? 信号检测与分析:光电倍增管(PMT)、补偿 电路。荧光信号转换为电信号,并将信号放大。 ? 存储、显示、分析系统:计算机。 ? 细胞分选系统 流式免疫分型技术要点 标本的获取和运输 标本的制备和染色 仪器的校准和质控 流式细胞仪数据获取与储存 FCM的主要测定指标 FSC, SSC, FL1, FL2, FL3 (FL4) 其中: FSC:反映细胞的大小 SSC:反映细胞内颗粒性 FCM标记方法 单标: 一种单抗/tube: FL1, FSC, SSC(三参数) 双标: (两种单抗/tube):FL1, FL1, FSC, SSC(四参数) 三/四标: (三种单抗/tube)(四种单抗/tube): FL1-FL3/4, FSC, SS

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