动物病毒病的实验室诊断 - 资源库.pdf

动物检疫检验技术 专业教学资源库 动物病毒病的实验室诊断 动物病毒病的实验室诊断 u 回顾：病毒的特点 u 病毒病的实验室诊断方法 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 回 顾 病毒的特点 （一） u 病毒粒子个体极微小 必须用电子显微镜才能看得见 u 病毒必须在活的易感宿主细胞内增殖 病毒培养的方法：动物接种、禽胚培养、组织细胞培养 u 病毒感染可刺激机体产生免疫应答 血清学试验可检测病毒抗原或抗体 u 病毒单一核酸型 （RNA或DNA） RNA病毒—RT-PCR DNA病毒--PCR 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 复 习 病毒的特点 （二） u 有的病毒能在感染细胞中形成包涵体 病理学技术检测包涵体 u 有的病毒具有凝集动物红细胞的特性 HA-HI检测病毒或其抗体 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 动物病毒病的实验室诊断 u 病料的采集、保存和送检 u 病毒的分离培养 u 包涵体检查 u 血清学诊断 u 动物试验 u 分子生物学诊断 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 电镜下的病毒粒子 本页图片来自百度搜索 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 电子显微镜及其报价 本页图片来自百度搜索 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 病毒性病料的采集 采集原则 防止污染、无菌采样、适当时机、适当部位 采集方法 同细菌病料采集方法 保存和送检 保存：短期保存于4C；长期保存于-20C以下 的冰箱。 送检：做好记录，尽快送检 病料的处理：不同检测方法，处理方法不同 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 病毒的分离培养 • 方法 – 动物接种、禽胚培养、细胞培养 • 病毒增殖具有一定的细胞特异性，因此培养时 应选择适当的方法 – 能否增殖？能否获得高的滴度？能否产生明显病变？ 《动物检疫检验技术专业教学资源库》 病毒培养的病料处理 • 匀浆 破碎组织，释放病毒 – 称重，加入生理盐水 （组织:生理盐水 1:4） – 剪碎 – 匀浆(匀浆管或研钵) • 冻融 进一步释放病毒 – 反复冻融3-5次 • 离心 除去细胞碎片 – 低速离心 • 除菌 除去样品中的细菌 – 高速离心、抗生素处理、过滤除菌